NGS的特点及应用的思考
2025-8-20 16:29|
编辑: 归去来兮|
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评论: 0|来源: 科研入门狗
摘要: 利用不同技术平台的优势，可以最大化的解决我们的问题。
| 和很多人都讨论过，NGS技术的应用及特点，但是感觉很多人还是没有深刻理解该技术的应用特点。我这里只分享我的经验和看法，比如NGS（高通量测序技术）的数据量多优势特点。我利用这个特点，开发了很多检测技术，如插入位点技术、突变检测技术。如下图所示，每个区间都可以给我们很多reads序列，如何利用这些reads序列，是我们后续开发的方法。我这里举例子：以前要想获得序列信息，我们必须要通过PCR扩增获得这些片段，才能获得序列信息，所以当年测人的基因组，花费了好几年，而且实验流程很繁琐，这也是一代测序的缺点，必须获得准确的条带，而且条带必须单一，要不然得不到准确的序列信息。而NGS测序就克服了这个缺点，我只需要保证目标序列在里面，我就可以测序获得准确序列，不需要担心其他干扰。因为，我的reads序列足够多，占比低一些，我也可以准确的分析出来。基于这个特点，开发了hitom技术、多重PCR检测技术（多个混合，也可以分开获得需要的序列）等一些技术。我这里最有体会的是侧翼链捕获技术，以前用tail_pcr，需要使用很多引物，必须拿到条带单一的胶图，才能测序获得。而现在，基于NGS技术，实验流程完全可以简单，利用兼并引物，只需要PCR获得侧翼链序列（就算占比很少）的混合物，也可以通过后续的分析流程拿到侧翼链的序列信息。这里真的极大地降低了实验难度，提高了成功率。一些技术方法和问题，你换一个技术，或许会简单很多。个人的心得体会。利用不同技术平台的优势，可以最大化的解决我们的问题。 |
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