细胞培养，这22个细节一定要注意！（一）

强强

       养细胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顾小孩一样仔细对待，爱护她，呵护她。如果你照顾的时候能注意这些问题，会让你的细胞养的更好。下面上海酶联生物就将养细胞的注意事项跟大家交流一下。

    细胞培养前的准备

    在您带上手套开始细胞培养之前，先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足，以免在开始实验后再次出入操作台，这样可以降低细胞污染的风险。

    细胞培养基也应先预热，选择只预热部分培养基而非整瓶加热，不但可以节约实验时间，而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解。

    结束操作后，别忘了培养基对光敏感，应尽可能避光保存。

    细胞培养的定期检查

    定期检查培养细胞的形态，即形状和外观，对于细胞培养实验取得成功至关重要。

    除确认细胞的健康状态外，每次操作细胞时通过肉眼和显微镜检查细胞还可早期发现污染征象，避免污染扩散至实验室其他细胞。

    细胞变质的征象

    细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。

    这些变质征象可能为多种原因所致，例如：

    培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质，或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。

    变质严重时将会成为不可逆的变化。

    细胞培养通风橱的消毒及布局

    保持细胞培养通风橱内的整洁有序，将所有物品置于直视范围内。

    向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇，擦拭清洁进行消毒。

    在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器；移液器置于右前方易于取用；试剂和培养基置于右后方便于吸取；试管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放废液。

    培养瓶/皿等物品的无菌操作

    无菌培养瓶、试剂瓶、培养皿等物品使用时方可揭开盖子，不得将其开放暴露于环境中，操作完成后尽快盖上盖子，取下盖子时应将盖子开口朝下放在工作台面上。

    进行无菌操作时不要说话、唱歌或吹口哨。尽快完成实验，以尽量避免污染。

    细胞培养中可能的污染物

    细胞培养污染物主要分为两类：

    化学污染物，如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。

    生物污染物，如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。

    可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术，降低污染发生的频率和严重程度。

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