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颠覆传统流式!赛默飞 Attune 系列流式细胞仪如何破解三大行业痛点?
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发表于 2025-5-21 14:16
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在生命科学研究领域,流式细胞术作为核心分析工具,长期受限于检测速度、样本堵塞及荧光溢漏等技术瓶颈。赛默飞推出的 Attune 系列流式细胞仪,通过声波辅助流体动力学聚焦(Acoustic-assisted Hydrodynamic Focusing)、模块化光学系统及智能抗堵塞设计等核心技术创新,为免疫学、肿瘤学及细胞治疗等前沿领域提供了集 “速度、精度、灵活性” 于一体的高性能流式解决方案。
一、
传统流式细胞仪的技术瓶颈解析
检测速度受限
:传统流式细胞仪依赖鞘液压力实现样本流聚焦,高速检测时由于样本流变宽,导致光子收集效率下降,数据变异系数(CV 值)显著升高。
复杂样本处理难题
:组织消化液、冻存细胞、骨髓样本等含有细胞碎片或粘性成分,易造成仪器管路或流动室堵塞,导致实验中断;同时,高剪切力环境可能损伤细胞活性。
多参数、低丰度信号检测挑战
:对于循环肿瘤细胞(CTC)等稀有细胞,或低表达量的细胞表面标志物,尤其是做15色以上指标检测时,传统检测系统的背景噪声偏高或不同染料之间的荧光溢漏问题,常导致信号漏检或假阴性结果。
二、
赛默飞Attune 系列核心技术创新与性能突破
声波辅助流体动力学聚焦(Acoustic
-assisted
Hydrodynamic Focusing)
通过超声波形成声场,将样品细胞在进入流动室前预先排成细一列,且不受鞘液流速限制,实现
1,000 μL/min超高流速
下的稳定数据输出,光子收集效率提升30%。
全光谱模块化光学系统
支持1–6激光自由组合(覆盖紫外到近红外全光谱),荧光检测通道可扩展至
51色
,满足高参数流式实验需求。
抗堵塞与温和样本处理设计
采用注射泵进样系统,流动室直径扩展至200 μm,结合声波聚焦减少细胞与管壁碰撞,粘性样本(如原代组织,肿瘤细胞系等)可连续运行8小时无堵塞。
三、
Attune 产品家族:精准匹配多元应用需求
(一)Attune™ NxT流式细胞仪: 模块化效率标杆
1. 核心技术
声波辅助流体动力学聚焦(Acoustic
-assisted
Hydrodynamic Focusing)
通过超声波(频率>2 MHz)在流动室中形成声场,利用声波将细胞精准排列至中心轴线上,形成单列细胞流。与传统流体动力学聚焦依赖鞘液压力不同,声波聚焦通过能量场主动调控,不受鞘液流速限制。
高速低损:支持10–1,000 μL/min流速范围,最高事件采集速度达35,000 events/sec,较传统流式上样速度提升10倍;
抗鞘液比例波动:光子收集效率提升30%,即使样本稀释(如稀有细胞分析)仍能保持CV值<3%。
在1,000 μL/min流速下,处理全血样本(含血小板)时,样本中心流宽度(Core Stream Width)仅2 μm,较传统聚焦(>10 μm)显著降低信号的CV值
模块化光学与液流系统
支持1–4激光自由组合(蓝488 nm必选,紫405 nm、红637 nm、黄561 nm可选),荧光检测通道可扩展至14色。
平顶光斑激光器(Flat-Top Laser Profile):光束强度分布均匀,降低光学失准敏感性。实验数据显示,平顶光斑激光器在±5 μm偏移时,CV值波动<1%,而高斯分布激光器(传统机型)波动可达5%
固定光路焊接光纤:预校准设计,用户无需手动维护,开机稳定性提升90%
免洗免裂解(NW/NL)实验流程
利用紫激光(405 nm)与蓝激光(488 nm)的散射光参数,无需裂解红细胞可直接分析稀释的全血样品(1:10稀释)。血红蛋白在405 nm处强吸收,红细胞的侧角向散射光信号比白细胞和血小板的弱,通过物理参数实现白细胞与红细胞/血小板的分离。样本制备时间从传统流程的65–130分钟缩短至20–40分钟,细胞回收率>95%。
2. 适用场景与数据验证
免疫表型分析
小鼠脾脏淋巴细胞免疫分型(CD4+/CD8+ T细胞、B220+ B细胞),14色实验方案中,分辨率(R值)>2.5,CV<3%,在30,000 events/sec采集速度下,1×10⁶细胞样本仅需33秒即可完成分析。
稀有细胞检测
循环肿瘤细胞(CTC)富集,通过声波聚焦在1 mL/min流速下处理低浓度样本(10 CTCs/mL),捕获效率>85%。
高通量筛选
搭配CytKick Max自动进样器,96孔板(20 μL/孔)可在22分钟内完成整板检测,日均处理量>2000个样本。
(二)Attune™ CytPix成像型流式细胞仪: 形态学成像与流式数据同时兼得
1. 核心技术
实时高分辨率成像系统
物镜:20倍放大,数值孔径(NA)0.45,分辨率达0.3 μm/像素;
脉冲激光:405 nm激光脉冲宽度<50 ns,冻结细胞运动,消除拖影。
支持6,000帧/秒图像采集(512×512像素),单次实验可存储>10⁶张细胞图像
AI驱动的形态学参数分析
30+量化指标,包括:
形态学:圆形度(Circularity%)、周长(Perimeter)、面积(Area²);
复杂度:强度熵(Entropy)、对比度(Contrast);
互作分析:颗粒计数(Particle Count)、黏连指数(Clump Index)。
用户可通过图像标注工具自定义模型,优化复杂样本(如巨噬细胞伪足、神经元突触)的分析精度。训练后模型对非规则细胞边界的识别误差从15%降至<5%。
声波抗堵塞与低剪切力设计
流动室直径扩至200 μm,结合声波聚焦减少细胞与管壁碰撞。处理粘性样本(如原代组织样品、肿瘤细胞系等)时,连续运行8小时无堵塞,细胞活性>98%。
2. 适用场景与数据验证
细胞相互作用研究
CAR-T细胞与肿瘤细胞共培养,通过“颗粒计数”参数识别双细胞粘连事件,误判率较传统FSC-A/SSC-H门控降低4.2%。在200 μL/min流速下,10⁶细胞/mL样本中检测到0.1%的细胞互作事件,信噪比(SNR)>10。
稀有细胞检测
外周血中循环内皮祖细胞(EPC)检测,通过图像回溯排除血小板聚集造成的假阳性,特异性提升至99%。
复杂样本质量控制
组织解离液(含细胞碎片)分析中,AI模型自动过滤碎片,目标细胞纯度从70%提升至92%。
(三) Attune™ Xenith全光谱流式细胞仪:高参数光谱分析巅峰之作
1. 核心技术
6激光51荧光通道光谱系统
紫外(349 nm)、紫(405 nm)、蓝(488 nm)、绿(532 nm)、黄(561 nm)、红(637 nm)、近红外(781 nm),覆盖全光谱激发需求。
超宽动态范围PMT:支持10⁴–10⁶光子计数,避免高表达指标(如CD45)的信号饱和;
光谱拆分算法:基于非负矩阵分解(NMF),可解析32色光谱方案中的重叠染料(如BV421与Pacific Blue),补偿误差<0.5%。
双模式补偿兼容性
传统补偿:适用于10色以下实验方案,通过单阳对照快速进行校准;
光谱拆分:支持高参数实验方案(>20色),利用全光谱指纹库(含Super Bright™、Qdot®等染料)解析荧光信号,通量提升50%。
智能诊断与自动化维护
内置摄像头实时拍摄流动室状态,AI算法自动识别污染(如蛋白质沉积),预警准确率>95%;触屏界面提供step-by-step指引,日常仪器清洗时间从30分钟缩短至10分钟。
2. 适用场景与数据验证
超高维免疫图谱分析
小鼠肿瘤微环境32色分析(图14),同步检测T细胞耗竭标志(PD-1、TIM-3)、巨噬细胞极化(CD206、CD86)及代谢状态(HIF-1α),数据采集速度100,000 events/sec,分辨率(ΔMFI)>200。
小颗粒分析
轻松进行外泌体(50–150 nm)检测,利用紫激光(405 nm)小角度散射(SSC)通道,信噪比(SNR)达8:1,较传统蓝激光提升3倍。
多组学整合
单细胞转录组(scRNA-seq)预分选,通过细胞死活染料(LIVE/DEAD™ Fixable Violet)与表面标志物(CD3、CD19)联合筛选,细胞活性>99%,分选纯度>98%。
四、
技术革新引领行业未来
赛默飞 Attune 系列流式细胞仪通过声波聚焦技术重构流速与精度的平衡,以模块化设计满足从基础表型分析到超高维光谱解析的全场景需求,其免洗免裂解实验流程、AI 形态学分析及智能维护系统,显著提升实验效率与数据可靠性。在高参数免疫表型分析、肿瘤微环境解析、CAR-T 细胞治疗质量控制、稀有细胞检测等前沿领域,Attune 系列流式细胞仪正通过技术创新重新定义流式细胞仪的性能标准,为生命科学研究和精准医学与转化提供关键技术支撑。
如需获取更多技术细节或定制化产品解决方案,欢迎访问:
https://app-u.jingsocial.com/surl/bOsbw9s
进行咨询,赛默飞专业团队将为您提供全流程支持。
结语
赛默飞 Attune 系列流式细胞仪以创新性技术突破传统桎梏,在速度、精度、灵活性上实现三重跃升,成为生命科学研究从基础检测到前沿探索的全能工具。随着高通量、多维度分析需求的持续增长,Attune 系列流式细胞仪将持续引领流式技术革新,助力科学家解锁更复杂的生物学机制,探索更多未知的研究领域!
原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/1906349766020949261
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