打假 | 真假ELISA试剂盒辨别大揭秘！

病理医师

前两篇推文主要为大家介绍ELISA的基础知识与实验操作及结果分析，本期推文作为一文解答ELISA所有疑问系列的最后一篇，则要教大家如何挑选合适可靠的ELISA试剂盒。下期咱们就要开始分享研究领域相关干货啦！敬请期待~
做实验遇到假试剂太令人崩溃了！不仅浪费时间和精力，还可能耽误整个研究进度。ELISA试剂盒是造假的重灾区，令大家头疼不已，一不小心就被迫“数据造假”了。别慌，今天咱们就一起来扒下他们的伪装！还装！收你们来了！

首先我们来看看市面上的常见的造假手段都有哪些，又该如何破解。

常见ELISA试剂盒造假手段及识别方法

1.虚标检测指标数

手段：公司成立时间短，却声称覆盖上万种指标（包括冷门种属），产品目录异常齐全。
破解：选择专注抗体领域的老牌供应商，优先考虑有多年研发经验的企业，警惕“产品齐全”的小公司。
2.检测样本造假

手段：未验证天然样本
破解：索要验证数据，要求提供天然样本检测结果。
3.同一标准品替代不同指标

手段：用同一标准品冒充多个指标，交叉实验显示不同试剂盒的标准曲线完全一致。
破解：交叉实验验证，使用同一公司的两个试剂盒进行交叉测试，若标准曲线一致则为假货。干扰实验，加入特异性抗原与检测抗体预孵育，若标准曲线正常则说明抗体不匹配。
4.滥用“万能指标”

手段：利用TGF β等高同源性蛋白伪造其他指标检测结果。
破解：多次重复实验，观察结果是否符合预期波动范围。
多技术交叉验证：结合WB等方法确认结果一致性。
5.种属不符的试剂盒替代

手段：用不同种属试剂盒替代，依赖同源蛋白交叉反应，但灵敏度下降。
破解：严格核对说明书，查看天然样本验证数据
6.假冒进口分装

手段：声称“进口分装”，但知名品牌通常不提供分装服务（尤其是ELISA试剂盒），分装易导致污染或比例失衡。
破解：索要原厂证明，要求提供原厂包装、批次号及进口报关单。
验证公司资质：通过官网、宣传资料、科研论坛等查询判断是否为皮包公司。
7.以次充好，稀释真品

手段：使用国产或不明来源试剂冒充进口货，或稀释抗体降低效价。
破解：检查包装与标签，假货常存在印刷模糊、批次不一致等问题。测试低浓度样本，稀释后若信号异常弱则可能被稀释。

Tips：通用防伪策略

1.检查包装与说明书

正规产品包装完整，说明书含详细质检数据及实验参数,如标准曲线、线性范围、
回收率、精密度、灵敏度、检测范围、天然样本验证、特异性等。
2.技术文件索要

要求提供COA（质量分析证书）、实验案例及抗体来源说明。
3.价格与品牌选择

警惕超低价产品，选择专注抗体领域的老牌供应商。通过搜索引擎、科研论坛搜索“品牌名+假货”，查看用户真实反馈。  
4.拒绝“万能试剂盒”

声称能检测多种样本多种种属产品齐全且价格极低的试剂盒多为假货。  

好啦，解决了假货的问题，我们再来看看如何在“真”试剂盒的基础上挑选适合自己实验的试剂盒。

ELISA试剂盒挑选5大核心要素

1.明确研究种属

选择与目标物种匹配的试剂盒（如人、小鼠、大鼠）。
2.匹配样本类型

确认试剂盒是否支持待测样本（血清、血浆、细胞上清等）。   
3.预测靶蛋白浓度

可以通过查阅文献或数据库确定样本中靶蛋白的参考浓度。小P的同事们一般通过https://pax-db.org/这个网站来辅助判断。根据浓度范围选择试剂盒灵敏度及检测范围。
以Human IL-6 ELISA Kit 试剂盒（货号：KE00385）为例：


在说明书中我们可以看到试剂盒检测范围：7.8-500 pg/mL（有两种稀释液，一种稀释液对应一个标曲），这表示该试剂盒的标曲范围：当样本代测指标浓度在7.8-500 pg/mL之间时可以被准确测定。那当待测样本浓度< 7.8 pg/mL时该怎么办呢？此时则需要考虑说明书中“灵敏度”这个指标。它指的是试剂盒的分析灵敏度，在该说明书第 8页（其他靶点可根据说明书目录进行查找），灵敏度值为0.2 pg/mL，说明待测样本在 0.2-7.8 pg/mL 范围时是可以检测，但是测定值并不一定准确。
当测定值<0.2 pg/mL，则认为该测定值为稀释液的“0”浓度所在的范围。


当我们的待测样本的浓度 >500 pg/mL时又该如何呢？此时需要对样本进行最佳稀释比的摸索，使其浓度落在标曲范围内。比如PHA 刺激PBMC 3天后细胞上清中样本值在 39 ng/mL，需要将样本稀释100倍，使待测样本落在标曲范围内。为了找到最佳的稀释比，可以用少量样本进行预实验，同时也可以参考说明书中“样品制备”部分的建议。04仔细查看厂家质检参数
查看说明书中的质控数据：标准曲线、线性范围（80-120%）、回收率（80-120%）、板内/板间CV值（<10%）、天然样本验证、特异性验证等数据。  
推荐选择通过ISO认证且提供完整质检报告的品牌。
5.预算与性价比平衡

避免低价陷阱，选择口碑好、文献引用多的品牌，确保数据可重复性。  
小P作为专注抗体研发生产二十余年的行业先锋，始终相信优质抗体是构建优质抗体对的基础，而精准配对的抗体对正是高品质检测试剂盒的核心组件。好抗体成就好抗体对，好抗体对成就好试剂盒。

为什么选择Proteintech ELISA试剂盒

1.我们有严格质检标准

我们的ELISA试剂盒精选高特异性抗体对，采用4FL参数拟合标准曲线，线性范围80-120%，回收率在80-120%之间，板间板内差异<10%，并且均经过了经过天然样本验证及特异性验证（可在ELISA试剂盒说明书中查看）。  
2.我们能覆盖热门研究领域

产品覆盖范围广，涉及癌症、免疫学、心血管、干细胞、神经生物学、细胞生物学、代谢、信号传导、表观遗传学等多个热门研究领域。
3.我们可以让你灵活搭配，选择自由度更高

可提供抗体对套装及7500+PBS only抗体对，轻松DIY自己的专属试剂盒。   
4.我们有良好的口碑和可靠的服务

凭借着我们二十多年专业的研发经验、严格的质检质控，目前ELISA kit已有2500余次的SCI文献引用，其中不乏Cancer、Cell、Gastroenterology等顶刊。同时，我们还有配套数据分析工具——Proteintech ELISA Data Analyzer（点击本段文字即可跳转体验），三步生成标准曲线，快速计算浓度。

好啦，本期的ELISA干货分享就到这里啦，欲知后事如何，且听下回分解～下期将为您带来领域研究相关干货啦！

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