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什么是细胞共培养?
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发表于 2025-4-5 16:38
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发表于 2025-4-5 16:39
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细胞培养分布不均匀怎么办?
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雷达卡
发表于 2025-4-5 16:40
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细胞共培养又称为复合培养或混合培养,是指将2种或2种以上细胞放在同一培养系统中培养。与单层细胞培养技术相比,细胞共培养技术可以很大程度地模拟体内环境,以便更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用,通过检测不同细胞因子之间的关系,探讨药物的作用机制和可能的作用靶点。细胞共培养技术一直倍受关注,主要用于研究诱导干细胞分化、提高代谢物产量、提高细胞生存能力、维持细胞功能和活性、体外组织的构建等。目前,细胞共培养方法主要包括直接接触共培养、间 接接触共培养和三维细胞共培养,3 种方法的选择主要根据 共培养细胞的正常形态、研究者的目的以及研究能否方便、 顺利进行而决定。
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队长是我
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雷达卡
发表于 2025-4-5 16:41
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什么是共培养?
共培养是指将两种或两种以上的细胞放在同一培养系统中培养,来研究细胞间的相互作用。既然要研究两种或两种以上细胞的相互作用,我们肯定是想观察它们是如何相互影响的,比如A细胞的存在就会促进或抑制B细胞的生长(即维持细胞生长);A细胞分泌的物质(如:细胞因子)会影响B细胞功能(如诱导细胞分化、增殖、分泌、成血管能力等),所以第一步我们应该要明确细胞特性(即
研究其与其他细胞共培养的必要性
)。
明确共培养的细胞特性
神经元原代培养需要一定的星形胶质细胞支持,采用混合培养、插入式培养皿、Banker共培养等与星形胶质细胞共培养,来研究神经元生长发育、损伤及损伤后修复;原代新生心肌细胞体外培养必须要有心脏成纤维细胞的支撑;免疫细胞与肿瘤细胞共培养,可开展肿瘤免疫相关研究。
那共培养主要有哪几种方式呢?主要可分为直接与间接共培养方式
直接共培养
A细胞与B细胞
直接接触培养
,如原代神经元与星形胶质细胞,原代心脏心肌细胞与成纤维细胞等。
间接共培养
间接共培养顾名思义,细胞间没有直接接触,是为了探究一种细胞对另外一种细胞的生命过程的影响,而排除由于细胞直接接触引起的影响。
1)嵌入式细胞共培养法(Transwell小室):简单理解成用一张有
通透性
的膜将两种细胞隔开,此膜的通透性体现在膜有孔,孔径大小0.1-12 μm不等(膜的类型及孔径可根据细胞大小与细胞是否需要通过膜孔进行选择),这样就可以实现两种细胞间接共培养,且能研究细胞分泌的物质对另一种细胞生长、代谢等途径的影响(具体的Transwell小室原理将在后面的图解中结合实例讲解)。
2)条件培养基共培养法:用培养过一种细胞的培养基培养另一种细胞,两种细胞不直接接触(此种方法在文献中也较常见,如研究分泌因子的作用)。
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同花顺
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雷达卡
发表于 2025-4-5 16:41
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20世纪80年代后期,为了建立更类似于体内环境的培养体系,尽可能使体外环境与体内环境相吻合,从而使细胞间能相互沟通信息,相互支撑生长增殖,人们在细胞培养技术的基础上发展出了细胞共培养技术。细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于其具有更好地反映体内环境的优点,所以这种方法被广泛应用于现代细胞研究中。
目前,细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立:①直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触;②间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然后将这两种载体置于同一培养环境之中,使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触。
共培养体系主要作用:诱导细胞向另一种细胞分化;诱导细胞自身分化;维持细胞功能和活力;调控细胞增殖;促进早期胚胎发育和提高代谢产物产量。目的是用于诱导细胞向另一种
细胞分化
,诱导细胞自身分化,维持细胞功能和活力,对细胞增殖进行调控,促进早期胚胎的发育和提高代谢产物的产量。
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大力水手
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雷达卡
发表于 2025-4-5 16:41
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细胞共培养是指将2种或2种以上细胞(来自同一组织或不同组织)放在同一培养系统中培养。细胞共培养技术可以很大程度地模拟体内环境,以便更好地观察细胞与细胞、细胞与培养环境之间的相互作用,通过检测不同细胞因子之间的关系,探讨药物作用机制和可能的作用靶点。
细胞共培养方法主要包括
直接接触共培养
、
间接接触共培养
和
三维细胞共培养
。
1、直接接触共培养
在合适的条件下, 将2种或2种以上细胞按照一定比例共同培养在同一培养皿中。
适用于体内邻近的组织细胞以及2种生长状态相同的细胞,主要用于研究细胞间相互作用以及诱导细胞分化。
2、间接接触共培养
①条件培养基共培养法:
用培养过一种细胞的培养基培养另一种细胞,2种细胞不直接接触,而细胞因子可以交流,其优点是可以消除目的细胞对条件细胞的影响,突出条件细胞对目的细胞的作用。
②“爬片式”共培养法:
将一种细胞先接种在处理后的玻片上,待细胞贴壁后,以一定比例放入另一种细胞的培养皿中与其共培养。
③嵌入式细胞共培养法(Transwell小室)
:Transwell小室是一类有通透性的杯状装置, 杯子底层放一张有通透性的膜,一般常用的是聚碳酸酯膜,孔径大小有0 .1~12 .0 μm。将Transwell小室放入培养板中, 细胞A种在上室内,下层种植的细胞B培养液中的成分可以影响到上室内的A细胞,从而可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A生长、运动等的影响。
3、三维细胞共培养
选用微结构或生物降解材料创造三维共培养微环境。
4、细胞共培养体系在离体实验中的作用
①诱导细胞向另一种细胞分化;
②诱导细胞自身的分化;
③维持细胞的功能和活力;
④调控细胞增殖;
⑤促进早期胚胎的发育;
⑥提高代谢物产量。
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