一文了解医疗器械分类目录2204免疫分析设备及方法学的区别

幸福侠侣

大家好，我是流式荧光崔工，一个旨在链接与流式荧光相关的朋友，一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。


前面5月28-30号在南昌参加2023年的CACLP展，由于疫情的放开，大家都反应今年比往年人多很多。
崔工有朋友说，第一天资料就发完了。
不知道是资料带少了，还是潜在客户增多了。

参展商今年跟去年差不多，都1200多家，展会的2楼也布了很多展台。

这几年的参展商基本上都是1000多家，以前是没有排到2楼。

这两年排到2楼，应该是1楼特展比较多的缘故，比如万泰生物，400多方的大展台。

1楼基本上都是特展，标展很少。

去年参加展会今年没来的有484家，占到了去年整体参展商的1/3以上。
有一些是崔工的朋友，当崔工问到他们为什么没有参展时，他们有点说，离上一次展会没过多久，就不参加了。
有的说，没啥效果，就不参加了。

还有一些企业跟大家想的一样，企业没能扛过3年疫情，不存在了。

当然还有其他我们不知道的原因。

今年的展会比较热门的是流式和发光。
有些刚进入IVD这个行业的朋友，特别是很多经销商来到崔工家的展台问他们有什么区别，有的还问这个跟酶免有什么区别。

其实他们只是应用场景不一样而已，但也不是完全不一样，有些都是重合的。

比如发光也可以用酶。
流式在医疗器械分类目录划到的是血液学分析设备，但细胞因子之类的检测又是跟发光类似的。

今天崔工按照医疗器械分类目录跟大家聊聊2204免疫分析设备这个目录，内容会很长，大家可收藏以后慢慢看。

在医疗器械分类目录中，2204免疫分析设备共有9个二级，分别是酶免疫分析仪、化学发光免疫分析仪、荧光免疫分析仪、免疫层析分析仪、免疫印迹仪、免疫散射浊度分析仪、免疫分析一体机、间接免疫荧光分析仪、生化免疫分析仪。

2204.01酶免疫分析仪
酶联免疫检测仪也就是酶标分析仪，通常由传输模块、试剂加注模块、孵育模块、光学模块、清洗模块和数据处理模块中的一种或几种组成。
原理一般为单色光经标本吸收后通过光电检测器将光信号转换成电信号，由数据处理系统经过计算得出浓度值。
包含全自动酶联免疫分析仪、酶联免疫分析仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。
酶联免疫检测仪设备在具体操作步骤是，将待测物体加入酶反应系统进行反应。反应结束后，加入底物，底物与酶反应产物反应后，产生吸光度和浓度成为一定关系的产物，通过酶标仪测量光密度的变化来确定待测物体的含量，敏感度可达nｇ水平。
常用于标记的酶有辣根过氧化物酶、碱性磷酶等。它们与抗体结合不影响抗体活性。这些酶具有一定的稳定性,制成酶标抗体可保存较长时间。
目前常用的方法有酶标免疫组化法和酶联免疫吸附法。前者测定细胞表面抗原或组织内的抗原;后者主要测定可溶性抗原或抗体。
具体的技术方法有：（1）酶联免疫吸附试验（ELISA），（2）夹心法，（3）BAS-ELISA。
（1）酶联免疫吸附试验（ELISA）：是将抗原或抗体吸附在固相载体表面。使抗原抗体反应在固相载体表面进行。可用间接法、双抗体夹心法或竞争法测定抗原或抗体。

（2）夹心法（sandwich assay）:将已知的特异抗体包装在固相载体（塑料板凹孔或纸片上），加入待检标本，标本中的抗原即可与载体上的抗体结合，洗去未结合的材料后加入该抗原的酶标记抗体，洗去未结合的酶标抗体，加底物显色，用酶免疫检测仪测量颜色的光密度，可定量测定抗原。
　　间接法（indirecr ELISA）常用于检查特异抗体。先将已知特异抗原包被固相载体，加入待检标本（可能含有相应抗体），再加入酶标抗Ig的抗全（即第二抗体），经加底物显色后，根据颜色的光密度计算出标本中抗体的含量。

（3）BAS-ELISA：近年来对酶免设分析法的改进是使用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂，组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度。可用来检测多种抗原抗体系统如细菌、病毒、肿瘤细胞表面抗原等。
一个亲合素（avidin）分子可以结合4个生物素分子（biotin）。结合非常稳定。亲合素和生物素都可与抗全、酶、荧光素等分子结合，而不影响后者的生物活性。一个抗体分子可偶联90个生物素分子，通过生物素又可连接多个亲合素。因此大提高检测的敏感度。
目前应用生物-酶标亲合素系统（BAS-ELISA），它是通过生物素标记抗体连接免疫反应系统，同时借助生物素化酶或酶标亲合素引入酶与底物反应系统。

2204.02化学发光免疫分析仪
化学发光免疫分析仪通常由加样模块、反应模块、光学检测模块（光电倍增管）、数据处理模块、温育温控模块和清洗分离模块等中的一种或几种组成。
原理一般为将化学发光反应发出的光信号转变为数字信号，由数据处理系统经过计算得出浓度值。
包含全自动化学发光免疫分析仪、全自动电化学发光免疫分析仪、全自动化学发光测定仪、化学发光免疫分析仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。
化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。
化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物，或电化学发光。
（1）常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester(A E),是有效的发光标记物,其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2)作用而发光,强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光。
吖啶酯作为标记物用于免疫分析,其化学反应简单、快速、无须催化剂;检测小分子抗原采用竞争法,大分子抗原则采用夹心法,非特异性结合少,本底低;与大分子的结合不会减小所产生的光量,从而增加灵敏度。
（2）从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。
目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P) ,它们有各自的发光底物。
（3）电化学发光，电化学发光是化学发光方法与电化学方法相互结合的产物，是指通过电化学方法来产生一些特殊的物质，然后这些电生的物质之间或电生物质与其它物质之间进一步反应而产生的一种发光现象。

2204.03荧光免疫分析仪
荧光免疫分析仪通常由加样模块、反应模块、光学检测模块（荧光）、数据处理模块、温育温控模块、清洗分离模块等中的一种或几种组成。
原理一般为将荧光信号转变为数字信号，由数据处理系统经过计算得出浓度值。
包含荧光免疫分析仪、干式免疫荧光分析仪、时间分辨免疫荧光分析仪、全自动荧光免疫分析仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。
当带样本检测卡插入荧光免疫定量分析仪时，内部二维码扫描器读取检测卡信息，处理器控制机械传动装置将检测卡传送到激光检测区域，根据二维码信息LED激发光源照射到检测卡，随后光信号被采集并转化为电信号；控制单元采集信号，根据软件自动计算测试样本中被测分析物的含量，输出到显示屏。分析仪自带热敏打印机，可直接打印检测结果。
荧光免疫分析仪是新发展起来的精密的免疫标记检测技术，与传统的酶联免疫法及金标法相比，荧光免疫分析仪灵敏度高，特异性强，操作方便，不用放射性物质作为标记物，因此具有无放射性、标记物稳定、便于长期保存、试验重复性好、分析速度快、样品用量少及标准曲线量程宽等优点。
免疫荧光技术的原理是在硝酸纤维素膜的测试区（T）包被 BSA 与抗原的偶联物，标记垫上含有预先包被的荧光标记抗体。



免疫层析原理示意图
检测时，首先用处理试剂将样本中的抗原与标记垫上的荧光标记抗体发生结合，形成免疫复合物，复合物在层析作用下沿着硝酸纤维素膜向前扩散至包被有另一种单克隆抗体的检测区，从而形成双抗体夹心复合物，而游离的荧光抗体则附着在质控区。
当检测卡插入荧光免疫分析仪后，光源照射到检测卡上，通过模块控制LED的发光强度以符合测量的强度要求，分析仪自动扫描检测区和质控区的荧光强度，传感器输出信号经放大和滤波处理后，进入转换芯片转化为数字信号交给处理器进行处理，通过两种荧光强度的比值计算待测样本中的抗原含量。

2204.04免疫层析分析仪
免疫层析分析仪通常由光电检测模块、机械扫描控制模块、控制主板模块、信息采集模块等组成。
原理一般为通过传感器将检测试剂卡的反射率信号转为光电信号，通过校准信息将光电信号转为相应的浓度值或阈值，对待测物进行分析。
包括免疫层析分析仪、金标免疫层析分析仪、胶体金免疫层析试条检测仪、金标斑点法定量读书仪、心脏标志物检测仪、金标测试仪、早孕/排卵试纸阅读仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。
免疫荧光层析法是一种将免疫层析和荧光检测相结合的方法。
在免疫荧光层析法中，首先需要制备特异性抗体，并将其固定在层析柱上。接着，将待检样品加入层析柱中，样品中的特定分子会与抗体结合，形成复合物。然后，通过荧光检测器检测样品中的荧光信号，从而确定待检分子的存在与否。
当然有些不需要荧光，如胶体金。

2204.05免疫印迹仪器
免疫印迹仪器通常由蠕动泵模块、加样模块、孵育模块、温控模块等组成。
原理一般为用电转移的方法将蛋白转移到固相膜上，最后进行免疫学检测。

包含全自动蛋白印迹仪、全自动免疫印迹仪、胎儿纤维连接蛋白分析仪、过敏源IgE抗体检测仪、全自动过敏原IgE抗体分析仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。
免疫印迹（immunoblotting）又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。
由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。
免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。
检测原理是将混合抗原样品在凝胶板上进行单向或双向电泳分离, 然后取固定化基质膜与凝胶相贴。
在印迹纸的自然吸附力、电场力或其它外力作用下, 使凝胶中的单一抗原组份转移到印迹纸上, 并且固相化。
最后应用免疫覆盖液技术如免疫同位素探针或免疫酶探针等, 对抗原固定化基质膜进行检测和分析。

2204.06免疫散射浊度分析仪
免疫散射浊度分析仪通常由光学模块、检测模块、计算机系统等组成。
原理一般为散射光比浊法。
包括特定蛋白分析仪、C反应蛋白分析仪、免疫浊度分析仪、便携式蛋白检测仪、散射比浊分析仪、全自动散射比浊分析仪、全自动蛋白分析仪、全自动化学比浊测定仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。
当光线通过被测溶液时，遇到抗原抗体复合物，光纤被粒子颗粒折射，发生偏转，光纤偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒的含量成比例。
该方法是目前应用的极为广泛的特定蛋白检测技术，可以覆盖从μg/L~g/L的浓度，特别适合血浆蛋白的检测要求，可以检测多种体液蛋白质。

2204.07免疫分析一体机
免疫分析一体机通常由加样模块、反应模块、光学模块、信号检测模块、计算机系统、温育温控模块和清洗分离模块等中的一种或几种组成。并由两种或两种以上检测原理的分析模块组成。
包括全自动化学发光酶免分析仪、多元磁珠荧光酶标分析仪、全自动双标记荧光阅读仪。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。

2204.08间接免疫荧光分析仪
间接免疫荧光分析仪器通常由荧光显微镜模块和软件模块组成。
包括全自动间接免疫荧光法分析仪、全自动间接免疫荧光判读系统。用于采集、分析、存储和显示间接免疫荧光载片的数字图像，提供核型及滴度判读建议。
间接免疫荧光是相对于直接免疫荧光而言的，具体原理是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后，再用荧光素标记的第二抗体（抗抗体）与抗原-抗体复合物中第一抗体结合，洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光，以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍，且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统，缺点是易产生非特异性荧光。

2204.09生化免疫分析仪
生化免疫分析仪通常由生化分析模块和免疫分析模块组成。
包含模块化生化免疫分析系统、全自动生化免疫分析仪、临床检验系统。与适配试剂配合使用，用于人体样本中待测物的定性和/或定量分析。

酶联免疫分析与化学发光免疫分析从分析原理上看差不多，所以在化学发光免疫分析中，有些发光物就是选择的酶。
荧光免疫分析和免疫层析分析他们有相通的地方。
荧光免疫法是一种利用荧光标记的抗体来检测特定分子的方法。
在荧光免疫法中，首先需要制备特异性抗体，然后将其与荧光染料结合，形成荧光标记的抗体。接着，将待检样品与荧光标记的抗体混合，如果样品中存在与抗体特异性结合的分子，则会形成荧光标记的复合物。
最后，通过荧光显微镜或荧光分析仪等设备观察样品中的荧光信号，从而确定待检分子的存在与否。
免疫荧光层析法是一种将免疫层析和荧光检测相结合的方法。
在免疫荧光层析法中，首先需要制备特异性抗体，并将其固定在层析柱上。接着，将待检样品加入层析柱中，样品中的特定分子会与抗体结合，形成复合物。
然后，通过荧光检测器检测样品中的荧光信号，从而确定待检分子的存在与否。

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