fish.融合基因.流式细胞术是什么关系？有什么区别？

幸福侠侣

fish.融合基因.流式细胞术是什么关系？有什么区别？
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FISH技术其实跟fish（鱼）一点关系都没有，是Fluorescence In Situ Hybridization四个单词首字母的，全称荧光原位杂交；顾名思义，用荧光染料标记的DNA探针与特定靶DNA序列互补杂交，通过荧光显微镜观测荧光信号的位置、大小及数量来判断待测序列的缺失、扩增、融合、断裂及易位等。
目前FISH技术可以检测的人的染色体中的靶序列约300多种，不包括一些用于科研的罕见基因靶序列，能够满足临床上大部分肿瘤及遗传疾病的检测需求。


FISH检测结果中的红红绿绿如何解读？FISH检测用的探针大部分目前用的都是绿色和橙红色标记的，主要分为染色体计数探针（缺失和扩增）和位点特异性识别探针（融合、重排、断裂等）。
计数原理是通过标记染色体或某个基因特有的DNA片段，与目的基因结合产生荧光杂交信号。例如，人的染色体是二倍体，如果检测正常人的DNA结果信号是两个，若信号比两个多或少的时候，表示该染色体或基因异常缺失或扩增。染色体计数探针用于检测染色体数目的异常。


融合基因的检测是用含有用两种不同颜色荧光素标记的探针(绿色和橙红色)，分别对应各自独立的靶基因位点，当两个独立的靶基因位点相互融合就会形成典型的两个融合信号即黄色或绿色和红色紧紧靠在一起；若没有发生基因融合，则显示个正常的绿色信号和一个正常的橙红色信号。


当某个基因发生重排时，会在相对固定的位置断开，用两种不同颜色的荧光素标记断裂点两端特异性的DNA片段；若基因没有发生重排，橙红色和绿色靠近会发生混合色黄色；如果发生断裂，则形成单独的橙红色和绿色。
FISH检测的样本可以是组织、血液、骨髓、羊水、脱落细胞以及2-3年的石蜡样本，费用几乎是分子检测里面最低的技术手段，主要用于疾病检测，广泛用于乳腺癌、肺癌、膀胱癌、宫颈癌、淋巴瘤等实体瘤的辅助诊断和血液肿瘤的研究，其目的主要集中在对肿瘤的早期诊断、疗效检测、个体化治疗和预后判断等方面。很多地方是可以纳入医保报销的。

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FISH，荧光原味杂交，应用荧光标记的DNA探针检测细胞中的特定基因是否表达、表达的量、是否异常、表达位置等信息，使用仪器是荧光显微镜；
融合基因，会提取检测细胞cDNA，应用已知融合基因引物kit，在RT-PCR仪检测进行扩增，如果存在融合基因，则可扩增出相应的产物，根据产物的荧光强度，还能检测出融合基因含量；
流式细胞术，使细胞形成单细胞悬液，应用荧光标记的抗体分子标记细胞，根据荧光分子表达情况检测细胞表面目的抗原。
关系：都应用荧光技术进行检测，
区别：检测的目的、方法、仪器均不同（顺带说一句，FISH和流式可以合作检测端粒酶，这种技术叫“FISH－Flow”因为是用流式仪检测的）