全国艾滋病检测实验室质量控制指南 中国疾病预防控制中心 二〇二四年十月

幸福侠侣

很多恐艾者对于检测的真实性会存在质疑，当然这主要原因就是自己多疑性格决定的，再有就是对检测的流程以及人员的素质，仪器，试剂准确率存疑，2024年十余发布了全国艾滋病检测实验室质量控制指南，摘抄了部分恐艾患者最关心的问题，希望能帮助到大家，感染了HIV找大夫治疗没毛病，检测排除还是看检测人员，术业有专攻，检测方法和窗口期数据，一线检测人员才最有话语权！
艾滋病检测工作是艾滋病各项防控工作的基石，在感染者的早期发现、准确 诊断、治疗效果评估、分子流行病学研究以及疫情流行监测工作中均发挥着重要 的技术支撑作用。随着我国艾滋病检测工作的持续发展和艾滋病检测服务可及性的不断扩大，艾滋病检测实验室数目逐年增长，检测能力不断下沉。承担艾滋病 检测工作的实验室已遍及全国各级医疗、疾病预防控制、采供血、妇幼保健、出 入境检验检疫、军队等各个系统。
1.人员培训和能力评估
实验室负责人应根据检测工作的复杂程度，对从事艾滋病检测工作的人员进行人员 资质筛选，符合要求的人员经过专业培训并考核合格后，可以进行授权并颁发上岗证。 只有获得上岗资格的人员才能开展工作，同时还需要对检测人员的检测技术能力进行持 续评估。  
1. 人员资质
实验室应制定程序文件对人员进行管理，并保留人员相关教育和专业资质、培训、 经历和能力评估等记录以证明满足相关要求。这些记录应随时可供相关人员利用，并应 包括（但不限于）以下内容：（1）教育和专业资质；（2）证书或执照的复件（适用时）； （3）以前的工作经历；（4）岗位描述；（5）新员工入岗前介绍；（6）当前岗位的培 训记录；（7）能力评估记录；（8）继续教育记录；（9）员工表现评估记录；（10）事故报告和职业危险暴露记录；（11）免疫接种情况（与指派的工作相关时）。实验室应对所有人员的岗位进行描述，包括职责、权限和任务。
从事艾滋病检测的技术人员在上岗前，应参照《全国艾滋病检测工作管理办法》中 的相关要求获得上岗资格，具体如下：  
1.1 从事艾滋病抗体筛查检测的人员，应接受过县级及以上的检测技术、实验室质 量控制及生物安全培训并进行考核，经考核合格后方可从事检测工作。  1.2 从事艾滋病抗体补充检测和 CD4+ T 淋巴细胞检测的人员，应接受过市级及以 上的检测技术、实验室质量控制及生物安全培训并进行考核，考核合格后方可从事检测工作。  1.3 从事艾滋病感染性样本核酸检测和基因型耐药检测的人员，应当经省级及以上 卫生健康部门指定机构进行检测技术、实验室质量控制及生物安全培训并进行考核，考核合格后方可从事检测工作。  
2. 人员的持续培训
检测人员上岗工作后，应定期参加常规专业技术或其他相关检测专业的培训及相关 活动。实验室除对检测人员提供持续性技术培训外，还应为所有人员提供持续性质量培 训，可包括但不限于以下内容：（1）质量管理体系；（2）所承担检测工作的过程和程 序；（3）适用的实验室信息系统；（4）人员健康与安全；（5）伦理；（6）患者信息 的保密。 实验室应对从事管理和技术工作的人员制定继续教育的培训计划，包括实验室外部 和内部培训，检测人员均应参加继续教育培训，实验室负责人应定期评估继续教育计划 的有效性。  
3. 能力评估
实验室应制定人员检测能力评估的内容、方法、频次和评估标准，评估其胜任所分 配的管理或技术工作的能力。能力评估应覆盖工作人员承担的所有检测项目，可以利用 人员比对、设备比对、标准品、留样再测、盲样测试、现场演示、现场提问等日常室内 质量控制的结果，也可以综合利用参加外部能力验证或室间质量评价的结果进行检测人 员能力评估。
评估工作间隔以不超过 1 年为宜。对新进员工，尤其是从事艾滋病抗体确证检测、 核酸检测和耐药检测等复杂操作试验的人员，在最初 6 个月内应至少进行 2 次能力评 估。当岗位变更，或离岗 6 个月以上再上岗，或检测标准、程序、技术有变更时，都应 对员工进行再培训和再评估，评估合格后才可继续上岗，并保存相关记录。根据定期评 估结果，必要时应进行再培训。评估标准应根据不同检测工作的复杂程度制定，比如耐 药检测工作，以对混合碱基的判读等关键环节进行考核评估。
设备的使用和管理
设备管理是实验室质量管理体系的一项重要内容，良好的实验室设备管理是确保实 验室检测结果准确的关键环节。艾滋病检测实验室应建立设备管理程序，对设备的选择、 采购、安装、校准和性能评价、维护、故障处理、维修以及报废处置等流程予以明确。   
1. 设备的验收
设备验收是证明设备在实验室环境下能够按照操作说明书所描述的功能正常运行， 运行技术指标符合设计要求，是设备验证的环节之一，通常在设备完成采购、安装后实施。设备验收分为形式验收和性能/技术验收，形式验收主要对采购设备的数量、外观、 配件配置等进行核查。性能/技术验收内容包括对设备进行功能测试、固定参数测试、数据存储/备份/存档的安全性核查。艾滋病检测实验室在开展设备功能测试或验证时，可使用厂商提供的测试样本、实验室已知定值的测试样本，将结果与预期值或认证值进行比较。如果设备受温度控制，例如 PCR 仪，需确定温度的稳定性和一致性。
设备验收完成后，在投入正式使用前，实验室应根据制造商提供的相关设备资料结 合实验室具体工作要求，制定设备的操作维护规程，并对人员进行培训。  
2. 设备的检定、校准和维护
如果设备属于国家规定应接受强制检定的计量器具，应按相关文件要求进行检定。 实验室应评估每台设备对结果有效性和计量溯源性的影响，合理地确定是否需要校准。 对不需要检定和校准的设备，实验室应定期核查其状态是否满足使用要求。对校准服务 不可及的设备，应定期请厂家或供应部门进行维护。实验室所涉及的计量器具和测试仪 器均应建立管理与登记制度。
检测方法的选择和验证
实验室需根据检测目的和检测方法特性，选择适宜的检测方法，并经过验证后方可 常规使用。本章将对检测方法的特点、验证时机及验证方法进行阐述。  
1. 艾滋病检测方法的特点和选择
艾滋病实验室检测主要包括 HIV 抗体检测或 HIV 抗体抗原联合检测、HIV-1 核酸 检测（分为定性和定量检测）、HIV-1 基因型耐药检测及 CD4+ T 淋巴细胞计数检测等。 其中 HIV 抗体检测、HIV 抗体抗原联合检测、HIV-1 核酸检测和 CD4+ T 淋巴细胞计数 检测试剂必须是经国家药品监督管理局注册、在有效期内的试剂。目前我国 HIV-1 基因 型耐药检测可采用商品化试剂盒和实验室自建（In-house）两种方法。



2. 检测方法的验证  
2.1 验证时机  
2.1.1 在实验室引入新的检测方法进行常规应用前，应进行检测方法的验证。  2.1.2 现用检测方法的任一要素发生变更后，如试剂升级、仪器更新、校准品溯源性 改变等，也应按照新引入检测方法的情况进行检测方法的验证。  2.1.3 任何严重影响检测方法分析性能的情况发生后，应在检测方法重新启用前对受 影响的分析性能进行验证。影响检测方法分析性能的情况包括但不限于：仪器主要部件 故障、仪器搬迁、设施和环境的严重失控等。  
2.2 定性检测的验证方法
2.2.1 验证参数及要求
定性检测方法的验证参数应至少包括方法学符合率。方法学符合率的验证应通过与 参比方法进行比较。参比方法包括但不限于：金标准方法、经验证性能符合设定标准且 日常室内质控和室间质评/能力验证合格的在用检测方法等。
此外，实验室应根据不同检验项目的预期用途，选择对检验结果质量有重要影响的 参数进行验证，如检出限、精密度、临界值、抗干扰能力等。不同技术平台、样本类型 以及预期用途不同时，所需验证的性能指标宜有所侧重。  
2.2.2 验证方案
（1）样本
免疫学定性检测方法：宜选取阴性样本 10 份（包含至少 5 份其他标志物阳性的样 本）、阳性样本 10 份（包含至少 5 份浓度在 cut-off 值和 2~4 倍 cut-off 值之间的弱阳性 样本，1 份极高值阳性），共 20 份样本，随机选取每 4 份样本分成一组。
分子生物学定性检测方法：宜选取阴性样本至少 5 例，阳性样本不少于 10 例（宜 包含弱阳性/低扩增的样本）。


3）可接受标准
可接受标准为所用厂商检验方法（候选方法）的标准。若无可用的厂商标准时，可 根据实验室检测方法的预期用途制定实验室方法验证的可接受标准。
2.3 定量检测的验证方法  
2.3.1 验证参数及要求
定量检测方法的验证参数应至少包括正确度和精密度。此外实验室应根据不同检验 项目的预期用途，选择对检验结果质量有重要影响的参数进行验证，如方法符合率、检出限、线性区间、抗干扰能力等。不同技术平台、样本类型以及预期用途不同时，所需 验证的性能指标宜有所侧重。
2.3.2 验证方案  
2.3.2.1 正确度实验室可采用偏移评估等方式进行验证。
（1）样本
按照如下优先顺序选用具有互换性的标准物质，或基质与待测样本相类似的标准物 质：  1）有证标准物质，包括国家标准物质、国际标准物质、CNAS 认可的标准物质生产 者提供的有证标准物质、与我国签署互认协议的其他国家计量机构，如 NIST、JSCC， 提供的有证标准物质等；  2）标准物质，如厂商提供的工作标准品；  3）正确度控制品；  4）正确度验证室间质评样本，如 CNAS 认可的能力验证提供者所提供的正确度验 证样本。宜根据测量区间选用至少 2 个浓度水平的标准物质样本。
（2）方法
每个浓度水平的标准物质样本至少每天重复测定 2 次，连续测定 5 天，记录检测结 果。计算全部检测结果的均值和偏倚，偏倚=结果均值−参考值。
（3）可接受标准
可接受标准为所用标准物质的使用标准。若无可用的使用标准时，可根据实验室检 测方法的预期用途制定实验室方法验证的可接受标准。  2.3.2.2 精密度
精密度指在规定的测定条件下，同一份样本，经多次取样测定所得结果之间的接近 程度。精密度包括重复性和中间精密度。在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结 果的精密度称为重复性。在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结 果之间的精密度，称为中间精密度。
（1）样本
可采用新鲜或冻存的样本。当样本中待测物不稳定或样本不易得到时，也可考虑使 用基质与实际待检样本相似的样本，如质控品。应至少评估2个水平样本的不精密度。当2个水平样本的不精密度有显著差异时，建议增加为 3 个水平。所选样本的被测物水 平应在测量区间内，适宜时，至少有1个样本的被测物水平在检测方法的检测限水平左右。


（3）可接受标准
实验室应根据实验室检测需求制定适宜的可接受标准。制定标准时宜考虑相关制造 商或研发者声明的标准、国家标准、行业标准、地方标准、团体标准、公开发表的临床 应用指南和专家共识等。
试剂的验收和保存要求
在通过实验室检测方法的验证后，检测试剂在日常使用中需要进行科学合理的验收 和妥善的保存，以保障试剂的持续有效，得到准确的实验检测结果。需要进行检测试剂 验收的情况包括但不限于：同一试剂更换使用不同批号产品时；同一类试剂更换使用不 同厂家产品时。  
1. 一般性验收
试剂的一般性验收需对试剂的物理性状进行检查，如出现以下问题，提示存在质量 隐患，应引起重视：运输或保存条件不符合试剂声称要求；运输包装、内盒或试剂盒存 在物理损伤；在单包装内存在混杂物质；标签出现错误、缺失或字迹模糊（特别是产品 名称或出产厂家名称，批号和货号，失效期或/和生产日期）；缺失目录；泄漏或污染； 保护包装纸破损或污染等。耗材的一般性验收同试剂的一般性验收基本一致，主要对耗 材的外包装、标签信息、外观等进行验收。
2. 技术验收
关键检测试剂在通过一般性验收后还需要进行技术验收以确认试剂的检测性能，通 过技术验收后方可正式投入实验室检测工作。  2.1 人免疫缺陷病毒抗体（HIV1/2）或抗原抗体联合检测试剂盒（快速检测）
2.1.1 推荐方案一
待验收试剂与之前使用的试剂，可进行平行检测，验证检测结果的一致性。平行比 对方案应至少选取 2 支阳性、1 支阴性的质控品或样本。平行检测结果完全一致，判定 技术验收通过；出现不一致结果时，判定技术验收不通过。  
2.1.2 推荐方案二
选取 5 支质控品或样本（3 支阳性、2 支阴性）对待验收试剂进行检测。检测结果 与预期结果完全一致，判定技术验收通过；否则，判定技术验收不通过。  2.2 人免疫缺陷病毒抗体（HIV-1/2）或抗原抗体检测试剂盒（酶联免疫法、化学发 光法、微粒子化学发光法、时间分辨免疫荧光法等）  
2.2.1 推荐方案一
待验收试剂与之前使用的试剂，可进行平行检测，验证检测结果的一致性。平行比 对方案应至少选取阴性及阳性的质控品或样本各 10 份。平行检测结果完全一致，判定 技术验收通过；出现不一致结果时，判定技术验收不通过。  
2.2.2 推荐方案二
选取 5 支质控品或样本（3 支阳性、2 支阴性）对待验收试剂进行检测。检测结果 与预期结果完全一致，判定技术验收通过；否则，判定技术验收不通过。
2.2.3 推荐方案三
如使用商品化质控品，应对同一份质控品进行 5 次平行检测，5 次检测值均落入质 控品标明的预期范围内（S/CO 比值范围），判定技术验收通过；如出现一次以上超预期 范围结果时，应进行复测，平行检测 5 次。仍出现超预期范围结果时，判定技术验收不通过。  2.3 人免疫缺陷病毒 1+2 型抗体检测试剂盒（免疫印迹法、重组免疫印迹法、线性 免疫印迹法）
2.3.1 推荐方案一
待验收试剂与之前使用的试剂，可进行平行检测，验证检测结果的一致性。平行比 对方案应至少选取 1 份已知全条带阳性样本、1 份条带不全的阳性样本和 1 份已知阴性 的样本。平行检测的阳性和阴性结果完全一致，判定技术验收通过；否则，判定技术验 收不通过。  
2.3.2 推荐方案二
应用 5 支质控品或样本（3 支阳性、2 支阴性）对待验收试剂进行检测。检测结果 与预期结果完全一致，判定技术验收通过；否则，判定技术验收不通过。  2.4 人免疫缺陷病毒（HIV-1）核酸（RNA）定量检测试剂盒（PCR 荧光探针法）  
2.4.1 推荐方案一
待验收试剂与之前使用的试剂，可进行平行检测，验证检测结果的一致性。平行比 对方案应至少选取 3 份原有试剂检测过的保存样本或者确定靶值的质控品，包括千级拷 贝/mL 或 IU/mL、万级拷贝/mL 或 IU/mL 和阴性的样本或质控品各 1 份。对阳性样本检 测，待验收试剂与之前使用的试剂检测结果 Lg 值之差均小于 0.3，对阴性样本检测无假 阳性结果，判定技术验收通过；否则，判定技术验收不通过。  2.4.2 推荐方案二
如使用商业质控品，应对同一份质控品进行 5 次平行检测，5 次检测值均落入质控 品标明的预期范围内，判定技术验收通过。如出现 1 次以上超预期范围结果时，应进行 复测，平行检测 5 次。仍出现超预期范围结果时，判定技术验收不通过。  2.5 人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）核酸（DNA 或 RNA）定性检测试剂盒（荧光PCR法）  
2.5.1 推荐方案一
待验收试剂与之前使用的试剂，可进行平行检测，验证检测结果的一致性。平行比 对方案应至少选取 1 份已知阳性样本、1 份已知阴性样本。平行检测的阳性和阴性结果 完全一致，判定技术验收通过；否则，判定技术验收不通过。  
2.5.2 推荐方案二
如使用商业质控品，应对同一份质控品进行 5 次平行检测，5 次检测值均与预期结 果一致，判定技术验收通过。如出现一次以上与预期结果不一致时，应进行复测，平行 检测 5 次。仍与预期结果不一致时，判定技术验收不通过。  
2.6 人免疫缺陷病毒 1 型（HIV-1）耐药基因型检测试剂盒（PCR-测序法、核酸扩增 荧光定量及测序法）  
2.6.1 推荐方案一
待验收试剂与之前使用的试剂，可进行平行检测，验证检测结果的一致性。平行比 对方案应至少选取 1 份已知高度耐药样本、1 份已知低度耐药样本。每份样本的蛋白酶 区和反转录酶区耐药位点的氨基酸与已知样本的氨基酸完全一致，判定技术验收通过。 否则，判定技术验收不通过。  
2.6.2 推荐方案二
如使用商业质控品，应对同一份质控品进行 5 次平行检测，5 次检测值均与预期结 果一致，判定技术验收通过。如出现 1 次以上与预期结果不一致时，应进行复测，平行 检测 5 次。仍与预期结果不一致时，判定技术验收不通过。  
2.7 CD4/CD8 细胞计数检测试剂（流式细胞法）  
2.7.1 推荐方案一
使用新鲜全血进行验收，采集 1 份新鲜抗凝全血样本，使用原有试剂与待验收试剂 分别进行 5 次平行检测。计算原有试剂检测结果的均值、标准差（SD），作为预期结果。 待验收试剂的 5 次检测值均落在原有试剂检测结果的均值±2SD 范围之内，判定验收通 过。如果有 1 个检测值落在均值±2SD 范围之外，重复检测 5 次。仍出现超预期范围结 果时，判定技术验收不通过。
2.7.2 推荐方案二
使用商业全血质控品进行技术验收时，应使用待验收试剂对同一份质控品进行 5 次 平行检测，5 次检测值均落入质控品标明的预期范围之内，判定技术验收通过。如出现1次以上超预期范围结果时，应进行复测，平行检测 5 次。仍出现超预期范围结果时， 判定技术验收不通过。  
3. 保存要求
试剂和耗材在完成一般性验收后，如无问题，必须按照说明书声称或外包装标签标示的保存条件进行保存，以保证试剂和耗材的有效性及实验结果可靠性。
艾滋病检测常用试剂的保存特点和注意事项如下：  3.1 HIV 抗体快速检测试剂: 一般存放温度为室温。HIV 抗体快速检测试剂的主要 载体为硝酸纤维素膜或明胶颗粒，受环境温湿度影响较大，因此此类试剂存放房间需温 湿度可控，保证室内温湿度满足试剂盒说明书的要求。  3.2 HIV 抗原和（或）抗体实验室检测试剂（酶联免疫法及发光类检测试剂）：酶联 免疫法检测试剂一般为整盒试剂，保存条件为冷藏（2~8℃）。发光类检测试剂因所使用 的检测平台多样化，实验所需辅助试剂、质控品、定标品的种类不同，需根据试剂盒说 明书要求分别进行保存，比如试剂盒的部分主试剂及辅助试剂保存条件为 2~8℃，而部 分冻干状态的试剂、质控品、定标品可存放于室温或 2~8℃，此类情况需要根据试剂盒 说明书要求进行分开保存。除温度要求外，部分试剂还要求避光保存。  3.3 HIV-1 核酸检测及基因型耐药检测试剂：一般情况下，核酸提取试剂多在 2~8℃ 保存，扩增试剂因含有活性酶成分多在-20℃或以下保存。现有一些冻干型的一体化检测 试剂也可保存于室温。HIV-1 基因型耐药检测试剂中含有精细组分，尤其需要保存妥当， 避免因外力挤压等因素导致精细组分受损，从而影响实验结果可靠性。  3.4 CD4+  T 淋巴细胞计数检测试剂：此类试剂为荧光素标记的单克隆抗体，一般情 况下需要在 2~8℃避光保存。
样本的采集、运送、接收和保存
艾滋病检测最常用的样本类型为血液样本，包括全血、血清、血浆、淋巴细胞富集 液、外周血单个核细胞、干血斑等。此外，在艾滋病抗体检测中还会用到的样本类型有 口腔黏膜渗出液和尿液等。良好的样本质量对于获得准确、可靠的检测结果非常重要， 样本质量的管理应贯穿于样本采集、处理、运送、接收、检测、保存、销毁的全流程。 实验室应制定样本的质量管理程序文件。
在《全国艾滋病检测技术规范》中介绍了样本种类及相应用途，描述了样本采样、 处理、保存、运送、接收等流程的通用要求。为保证良好的样本质量，在检测流程中还 应注意以下要点：  
1. 样本的种类
样本种类的选择取决于检测目的和所用试剂，不同检测标志物、不同检测方法甚至 同一检测方法的不同试剂产品对样本的种类要求可能不同。除《全国艾滋病检测技术规 范》中的通用要求外，实际工作中还要注意遵循试剂说明书的要求使用适宜的样本。
2. 样本的采集
口腔黏膜渗出液和尿液样本的采集方法参见试剂说明书。血液样本的采集要求如下：  2.1 应由具有采血资质并且经培训合格的人员执行。  2.2 采样前应核对受检者的身份信息，确认样本编码无误。  2.3 外周血采集应根据所需样本类型选择合适的采血管（表 1-1-4）。注意含有添加 剂的采血管应按规定的采样量进行样本采集，血液样本采集后应按照采血管说明书的要 求，立即将试管中的血液样本缓慢地翻转并按需要的翻转次数彻底混匀。


2.5 抗凝剂的选择：根据检测要求选用适当的抗凝剂，如 CD4+和 CD8+T 淋巴细胞 计数测定样本的抗凝剂可选用 EDTA 钾盐或钠盐、枸橼酸钠、肝素钠；HIV 病毒分离、 核酸定性/定量检测样本的抗凝剂可选用 EDTA 钾盐或钠盐、枸橼酸钠。特别应注意，肝 素钠抗凝的血液样本不能用于核酸检测。  2.6 感染预防和控制：样本采集应使用一次性无菌耗材，所需设备和耗材应清洁并 维护良好；样本采集人员应配备个人防护装备、进行手卫生；样本采集过程中产生的医 疗废物应按照国家相关法规处理。
3. 样本的处理  
3.1 对采集血液样本后需要进一步处理制备的样本（血清、血浆、淋巴细胞富集液、 外周血单个核细胞、干血斑），应依据采血管说明书的时限要求或经实验室验证的时间 完成样本的处理制备。  3.2 对采样后需要立即检测的样本，例如用于 HIV 抗体快速检测的全血、口腔黏膜 渗出液和尿液样本，可采集后即开展检测。
4. 样本的运送  
4.1 根据检测目的和样本种类，样本运送过程中的温度和时间应控制在适宜范围内。  4.2 样本在单位内部运送，应严格遵循生物安全要求、确保样本质量。  4.3 HIV 阳性或疑似阳性血液样本（干血斑除外）及 HIV 培养物样本在单位间运输， 应根据《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（卫生部 第 45 号令），获得《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本准运证书》才 能进行。  
5. 样本的接收  
5.1 对具有潜在感染性的血液样本（干血斑除外）和 HIV 分离物样本包装，应在BSL-2 实验室内的生物安全柜中打开，用后的包裹应及时进行消毒。无感染性的样本（干 血斑、口腔黏膜渗出液和尿液）不需要在生物安全柜中打开。  5.2 核对和检查：核对样本与送检单，检查账物是否相符；检查样本管有无破损和 溢漏，如有问题及时进行应急处置；检查样本的状况是否满足检测需求，如有问题及时 通知送样人。  5.3 填写样本接收单。
6. 样本的保存
6.1 检测前样本的保存：样本的保存条件和时限应根据检测目的和样本种类而定。 分离后的血浆或血清如在 3 天内使用可在 2~8℃暂时保存，3 个月内使用应冻存于-20℃ 以下，3 个月以上应置于-70℃以下冻存。  6.2 检测后样本的保存：需长期保藏的样本应置于-70℃以下保存。筛查结果为阴性 的样本，可根据具体需要决定保存时间，建议至少保存 1 个月。艾滋病检测确证实验室 收到的筛查阳性样本，无论补充试验结果如何，均应保存剩余样本，保存时间根据需要 确定，建议至少保存 3 年，特殊用途或专项项目的样本根据具体要求确定保存时间。补 充试验结果为阳性的样本按照国家生物样本管理的有关规定执行。  6.3 冻存样本应避免反复冻融，用于核酸检测的样本冻融不应超过 3 次。  6.4 HIV 阳性样本的保存应遵守高致病性病原微生物样本的生物安全管理要求，严 格实行双人双锁，防止被盗、被抢、被恶意使用或丢失。
7. 样本的销毁
对不再需要保存的样本，应经实验室负责人批准后进行高压蒸汽灭活，然后按医疗 废物处理。应保留样本销毁记录。
新近感染检测
HIV-1 新近感染检测不能用于个体诊断，可用于估计特定人群的 HIV 新发感染率， 为分析艾滋病流行特点和变化趋势提供科学依据。此外，HIV-1 新近感染检测还可用于 评估干预措施的效果、分析新发感染的热点地区和热点人群、以及指导对新近感染者进行溯源等防控工作。
1. 室内质控品选择  （重点哟，为了保证检测的正确性，每次检测都会设置很多的对照物）
1.1 选择原则
由于 HIV-1 新近感染样本来源困难，不易自制，因此一般使用试剂盒自带的内部质控品，包括阴性、弱阳性及强阳性质控品。有条件的实验室可加入外部对照质控品，包括新近感染样本及既往感染样本各1个。
1.2 质控频次
每块检测板均应做质控，包括阴性对照（双孔），校准品、弱阳性对照及强阳性对 照各3孔。
1.3 质控位置
按说明书要求设置，一般从第 1 列第 1~2 孔为阴性对照，第 3~5 孔为校准品，6~8 孔为弱阳性对照，第 2 列第 1~3 孔为强阳性对照。  
1.4 运行的有效性和结果的计算  1.4.1 确定对照和校准品的中值 OD 值 弱阳性对照、强阳性对照及校准品的中值 OD 值为 3 孔 OD 值排序后中间的值，而 不是平均值；阴性对照的中值为两孔 OD 值的平均值。  1.4.2 计算标准 OD 值（ODn）对照的 ODn 值＝对照的中值 OD 值/校准品的中值 OD 值  
2. 室内质控规则  2.1 阳性对照和校准品的中值 OD 值以及两个阴性对照的 OD 值均必须在试剂盒说明书提供的质控范围内，并且所有对照和校准品的 ODn 值均必须在试剂盒说明书提供 的质控范围内，该次试验的质控才有效。  2.2 若外部质控品包括已知新近感染样本及既往感染样本，检测结果应与预期结果 一致。  
3. 室内质控失控原因分析及处理
只要不满足质控规则的任一项，即判为失控，该试验无效，必须重复试验。若失控 原因来自设备（包括检测设备、孵育箱及移液器），则对设备进行维护及校准；若来自 试剂，则更换试剂；若来自人员操作失误，则严格按试剂说明书进行操作。

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