【个人-科研笔记分享】LC-MS技术基本原理

空白派

基本介绍
在这种技术中，样品首先在液相色谱（LC）中被分离，然后被送入质谱仪进行两级或多级的质谱分析。第一级质谱（MS1）负责离子化和初步的质量分析，然后选择特定的离子进行碎裂。产生的碎片离子在第二级质谱（MS2）中被进一步分析，这个过程称为串联质谱或MS/MS。
2.1高效液相色谱 High Performance Liquid Chromatography %28HPLC%29 使用液体作为移动相

• Q1：A液B液是什么？
  
• A液（溶剂A）
  
  
  
  • 组成：通常是低极性溶剂，如乙腈、甲醇或丙酮。
    
  • 作用：随着色谱过程的进行，B液的比例逐渐增加，从而降低肽段与固定相的吸附力，使肽段逐渐从色谱柱上洗脱。
    
  
  
• B液（溶剂B）
  
  
  
  • 组成：通常是高极性溶剂，如水、甲醇或乙腈，含有少量的酸（如甲酸或三氟乙酸）以帮助离子化肽段的脱质子化。
    
  • 作用：在色谱开始时，A液作为流动相的主要成分，有助于将肽段吸附在色谱柱的固定相上。
    
  
  

2.2高分辨质谱（High-Resolution Mass Spectrometry, HRMS）



质谱仪负责对经过液相色谱分离的样品进行检测和识别。样品分子在离子源中转化为气相离子，并通过一系列过程在质谱仪中进行检测。这些过程包括离子筛选、离子裂解和离子检测等。具体来说，质谱仪会扫描特定范围的离子，允许特定离子进入碰撞室。在碰撞室内，离子发生碰撞裂解，形成子离子。这些子离子进一步进入二级质谱进行扫描和检测，最终得到详细的质谱数据。MS频谱，通常指的是质谱（Mass Spectrometry，简称MS）产生的数据图谱，它记录了样品中各种分子或分子片段的质量与电荷比（m/z）及其相对丰度。质谱是一种分析技术，常用于鉴定和分析物质的组成。

• 基本操作方法：
  
  
  
  • 数据分析：通过分析质谱图，可以确定样品中分子的质量，以及它们的数量。
    
  • 检测：分离后的离子被检测器检测，生成一个质谱图，这个图上显示了不同m/z比的离子的强度。
    
  • 质量分析：这些带电的离子被引入到质谱仪的核心部分，通常是一个磁场或电场，它们根据质量与电荷比（m/z）被分离。
    
  • 离子化：使用特定的离子化技术，如电喷雾离子化（ESI）或基质辅助激光解吸/电离（MALDI），将样品分子转化为带电的离子。
    
  
  
  
  
  • 样品准备：首先需要将待测样品转化为可以被质谱仪分析的形式，通常是将其转化为气态的离子。
    
  
  

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