不同病理检测样本的固定要求

莺歌燕舞

我们在实验过程中，根据实验目的，对所获得的样本进行病理检测，样本固定是最重要的一环，固定方法选择不当会增加后续实验难度，甚至造成后续实验失败，因此根据样本种类和实验目的选择的方法尤为重要。那么今天就浅浅聊一下这方面的知识，希望对大家的实验有所帮助。
一、组织样本固定及运输条件
1.常规病理检测动物组织样本，用10%中性福尔马林固定液固定。
2.冰冻切片组织样本，用OCT包埋，液氮速冻，-80℃液氮保存。
3.免疫组化和荧光组织样本，用4%多聚甲醛固定液固定。
4.电镜组织样本，用2.5%戊二醛固定，4℃保存。
5.常规病理检测植物组织样本，用FAA（福尔马林-醋酸-酒精）固定液固定。


6.特殊的组织样本需用特殊固定液，比如眼球用Davidson固定液。
二、组织样本固定过程中注意事项
1.动物解剖后固定有两个基本原则：①组织离体后在30min内完成保存或固定；②固定液充足，固定液体积：组织体积=10：1。
2.将组织块投入固定液之后可以用摇床帮助固定，使组织块充分接触固定液，勿使其粘附于瓶底或瓶壁。
3.固定用容器应根据样本体积而定，不宜用V型底，细长管状容器保存。
4.组织如覆有血液或污物等，固定前用生理盐水洗去，以达到最佳的固定效果。
5.小动物脑垂体、主动脉、坐骨神经和眼球及其附属腺等易丢失的脏器放在包埋盒或Eppendorf管等另行固定。
6.大组织样本应切开固定，以免内部区域因固定不及时自溶腐败。
7.胃、肠道的内容物处理时不能挤压 ，防止破坏黏膜 ，可用注射器注射10%中性福尔马林或者4%多聚甲醛进入组织进行预固定，等待30min左右后，使用PBS清洗内容物。
8.肺等有较大空腔的组织，选择在固定液上放湿棉花团 ，防止组织漂浮在固定液上导致固定不充分。

三、细胞样本固定及运输条件
1.细胞爬片：爬片放入12或24孔板内，PBS清洗后4%多聚甲醛固定，-20℃保存，常温运输。
2.贴壁细胞：消化后，离心，保留细胞沉淀，PBS清洗，离心，保留细胞沉淀 ，4%多聚甲醛重悬，常温运输。
3.悬浮细胞：离心，保留细胞沉淀，PBS清洗，离心，保留细胞沉淀 ，4%多聚甲醛重悬，常温运输。
样本种类和实验目的多种多样，根据实验目的选择适合的方法实验就成功了一半。小伙伴们还有其他想了解的内容，可以后台私信我们呦~


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