分子 | 简单的聊一聊PCR的应用

莺歌燕舞

大家好，在这次新冠大流行当中，PCR检测是大显身手，那么，还有什么实时PCR的常见应用嘛？这是个好问题。
首先，实时PCR最常用的一点是来观察基因目标的相对表达水平，我们可以通过比较两个或更多的样本，例如来自未处理和处理过的动物细胞，以确定他们感兴趣的基因的表达是否发生变化以及变化的程度。


使用实时PCR技术，结合定制或预先设计的检测方法，我们也可以观察信使RNA或小RNA目标，包括特定的微RNA目标。
那么，作为一个实时PCR用户，我们还能用这台仪器来做什么呢？
一个常见的应用是使用标准曲线来计算目标DNA的绝对或相对拷贝数，它可以是食品或动物样本中的病原体、水中的微生物或任何其他可检测的核酸序列，新冠核酸检测就是其中一种。而且，qPCR在食品安全检测方面是非常常见的应用，我们会使用qPCR来检测食品样品中生物的百分比，以确保它们并不是用其他动物的肉来进行冒充。


基因组DNA目标的拷贝数研究对任何数量的实验室都相当重要，他们通常需要对具有不同拷贝数的转基因动物进行分离，或者检测和定量与特定表型相关的复制或缺失事件。


但大家也要意识到，其实我只提到了一些比较常见的应用，事实上，几乎所有需要对核酸目标进行定量的应用，我们都可以在实时PCR当中实现。
那么对于那些非定量的实验呢？
实时PCR检测也能满足我们的要求，也许最值得注意的是等位基因识别检测，它能检测DNA样品中特定的单核苷酸多态性，然后根据其同源或异源基因型进行分离。
同时，很多PCR仪器都还有一个选项，可以进行高分辨率的熔解实验，可以用于检查短DNA目标区域的甲基化百分比，或发现多个样本之间的微小序列差异。
除了基于核酸的工作外，实时技术越来越多地被用于研究蛋白质。如下图所示，我们可以将目标蛋白和DNA结合起来，通过对DNA序列进行扩增，来增加对目标蛋白的检测能力


好了，关于PCR的应用我们就说到这里，下次见~
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