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发表于 2024-12-29 07:07
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1.吸收光谱法
朗伯定律(1760年)
:
物质对光的吸收与物质厚度成正比:A=f(b)
比耳定律(1852年)
:
物质对光的吸收与物质浓度成正比:A=f(c)
朗伯-比尔定律
:
A
=
log(
I
/
I0
) =
e *C *
l
当一束平行单色光垂直通过均匀、透明的吸光物质的稀溶液时,溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层的厚度成正比。
2.透射比浊法
悬浮液和胶体溶液都具有向四面八方散射入射光的性质,当一束平行光通过含有悬浮质点的悬浮液或胶体溶液时,同时受到散射和吸收两个因素的影响,使光的强度减弱。
在光源的光路方向上测量透射光(实际上包括散射光)强度与入射光强度比值,并通过该比值测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度,称为
透射比浊法
。
该法可以与吸收光谱法共用一个检测器,所以生化分析仪不需增加任何部件,均可利用此法进行测定。
3.终点法
:指经过一段时间(一般为 10 分钟左右)的反应,整个反应达到平衡,所有的被测定物已转变为产物,反应液的吸光度不在增加(或降低),吸光度的增加(或降低)程度与被测定物的浓度成正比。
如:总胆红素、结合胆红素、血清总蛋白、血清白蛋白、总胆汁酸、葡萄糖、尿酸、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、钙、磷、镁等。
4.固定时间法
:指在一定的反应时间内,反应速度与反应物浓度的一次方成正比,由于反应物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的增加(或降低)速度越来越小,由于这类反应达到平衡的时间很长,必需在特定时间段内进行监测。
如:肌酐等。
5.速率法
:指连续测定(每15秒~1分钟监测一次)被测物反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间的变化,来求出被测物反应的初速度的方法,即连续监测法。
如:丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
干式生化原理及试纸结构
6.干片式生化:反射光度法
80 年代问世,预先将反应所需的部分或全部试剂固定在具有特殊结构的载体中,将液体样品加到载体上,待测物与载体中的试剂发生化学显色反应,最后通过目测定性或半定性,或通过一定仪器检测载体上信号的变化。
干式生化的检测方法:反射光度法
显色反应发生在固相载体,对透射光和反射光均有明显的散射作用,不遵从朗伯-比尔定律,并且固相反应膜的上下界面之间存在多重内反射,使用
库贝卡-芒克理论
,或以
威廉姆斯-克拉珀方程
予以修正。
原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/88455042
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