金桔
金币
威望
贡献
回帖0
精华
在线时间 小时
|
在我们培养细胞的过程中,换液是一项常规的操作,通过换液清除掉细胞在生长过程中产生的代谢废物,补充新鲜的含血清培养基,使细胞能够正常生长。今天我们简单讲讲换液操作
首先,我们需要准备好相应的实验器材:装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、废液缸。至于其他的超净台,培养箱等都是一个细胞间的基础设施,这里就不一一列出。
然后,我们需要把我们准备的器材放入超净台,打开紫外照射灭菌,值得注意的是若是培养的细胞对温度比较敏感,可以将含血清的培养基瓶子放入37℃的水浴箱使得培养基温度在37℃,再转移到超净台紫外灭菌,当然一般的细胞对培养基的温度不是很敏感,不用对培养基加温也是可以的。另外,细胞培养间也需要紫外照射半小时左右。
紫外照射灭菌后,我们应该穿好灭菌服,戴好灭菌手套和口罩,从培养箱取出细胞培养瓶,用酒精喷壶在培养瓶表面喷洒75%酒精消毒,转移培养瓶到超净台,打开盖子,轻轻吸出旧的培养液,可用移液器加入新鲜含血清培养基,注意一定不要从细胞贴壁面加入培养基,应从侧壁加,动作轻柔,以免冲落细胞。加好培养基后,盖上盖子,在培养瓶上做标记,注明换液时间,细胞种类,操作人员等信息。在放入培养箱之前应再次用酒精喷一喷培养瓶表面,然后应记得整理操作台,用酒精擦拭超净台台面,清理废液和垃圾。
注意,全程严格无菌操作!
原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/46851114 |
|