IVD产品经理系列—寻找特检项目（3）续篇

纳兰烙烙

小编昨天分享的是抗MICA抗体，全称人类白细胞抗原I类相关链A位点（MICA）抗体。今天将延续这个话题讲一讲MICA在临床应用那些事儿。

人类白细胞抗原I类相关链A位点（MICA）抗体检测临床所熟知的方法学有哪些呢？

1、微量淋巴细胞毒试验（microlymphocytotoxicitytest）

或称补体依赖的细胞毒试验（complement dependent cytotoxicity test，CDC）

2、PCR限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）

3、序列特异性引物PCR（PCR-SSP）

4、PCR序列特异性寡核苷酸探针分型技术（PCR-SSO）

5、PCR单核苷酸序列分析（PCR-SBT）

6、基因芯片

7、流式细胞交叉配型技术（Flow-XM）

8、酶联免疫吸附实验（ELISA）

9、免疫磁珠液相芯片技术（Luminex）

微量淋巴毒实验

原理：淋巴细胞膜表面具有HLA抗原，而分型血清中含有抗特定HLA抗原的细胞毒抗体，该抗体与淋巴细胞膜上的相应的HLA抗原结合后在补体的参与下损伤细胞膜，经染料染色后，通过观察细胞是否被染色来判断待测细胞是否损伤或死亡，进而判断抗原、抗体反应的强度。

死细胞（%）	记分	意义
0～10	1	阴性
11～20	2	可疑阴性反应
21～40	4	可疑阳性反应
41～80	6	阳性反应
0～＞80	8	强阳性反应

PCR限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）

原理：将目的基因片段PCR扩增后，利用多种限制性内切酶对扩增产物进行酶切，不同的基因序列会产生不同的酶切产物，从而产生不同的电泳图谱。它以其简单、敏感、准确，无需同位素等优点成为目前较常用的HLA基因分型技术之一，但是无法分辨杂合子，且只能区分有限的多态性。

聚合酶链式反应序列特异引物分型技术（PCR-SSP）

原理： 设计特异性引物，利用引物3'端的特异性，直接扩增相应的HPA片段，PCR产物凝胶电泳以后，以紫外线透射来检测，DNA条带的存在或缺失即可确定基因型。SSP-PCR操作比较简单，耗时较少，适合小批量标本，是目前HPA基因定型中最常用的一种技术。

PCR序列特异性寡核苷酸探针分型技术（PCR-SSO）

原理：根据各种HLA等位基因的碱基序列，通过人工合成与其互补的寡核苷酸，即SSO探针；待测标本基因组DNA中的HLA基因经PCR扩增之后，与SSO探针杂交，通过观察杂交发生与否，来判断待测标本的HLA型别。

PCR单核苷酸序列分析（PCR-SBT）

原理：以PCR扩增所要分析的基因片断，然后对DNA序列进行分析，可以直接得到基因型。分辨率高，可大规模进行，精确度高，能直接发现新的等位基因。但是由于杂合子的存在，无法分辨单元型。

基因芯片

原理：杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAATCTAG，与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列。

流式细胞交叉配型技术（Flow-XM）

流式细胞术(Flow Cytometry，FCM):是利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。

流式细胞补体依赖淋巴细胞毒交叉配型Flow-CDC能够特异性识别针对供者HLA基因的可活化补体经典途径的IgG类型抗体。Flow-CDC具有电子化、程序化、标准化、可对原始结果进行全程质控等优点，是一种将替代

经典补体依赖微量淋巴细胞毒交叉配型NIH-CDC成为淋巴细胞毒交叉配型标准技术的新方法。

酶联免疫吸附实验（ELISA）

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。

免疫磁珠液相芯片技术（Luminex）

Luminex 技术应用微球和流式细胞仪的原理。 微球内部含有三种荧光免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。  因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。该技术利用荧光编码的微球共价交联单克隆抗体，与被测定的目标分子结合后，加入荧光素标记的检测抗体，再通过激光扫描荧光编码来识别单个微球和测量“检测荧光”强度来确定被测分子的浓度。

关于HLA分型实验室的室内质量控制检验科是怎么认为的？

选取自《HLA分型实验室的室内质量控制》

1、遵循实验室标准

ISO15189标准之中5.6.2质量控制规定实验室应用与检验系统响应方式尽可能接近换着样品的质控物。应定期评审质控数据，一发现可能提示检验系统问题的检验性能变化趋势，并发现此类趋势时应采取预防措施并记录。

EFI标准C8条款要求建立对检测系统和一起进行持续的评估和监控以保证检测结果的准确性，并从人机料法环五个方面提出应该采取的应对措施。

ASHI标准D.4.1.8规定实验室建立程序对每个检测系统进行质量监控，程序文件中应对质控物的数量、类型和质控品率做出规定。

2、HLA分型实验室的检测系统

日常工作中针对不同检测方法建立的检测系统，可能需要采用不同的质量控制策略，才能有效监控监测质量。一般来说影响检测工作的精密度和准确性的因素主要有：

人员、仪器、试剂、方法、幻境。室内质控方法的建立应能有效反映出这5个环节出现的问题。

3、室内质控方法的建立

1）质控品的选择，选取应与检验标本相同的抗凝全血标本，有准确可信的检测结果和完整的监测记录。每次选取质控品标本的量应满足至少三十次以上的使用量，以满足在一段时期内收集质控品的观测指标做趋势分析，以期查找潜在的影响因素。

2）抽取2%标本做符合检验，对已完成检验的标本按2%随机抽取做复核检验，可以发现偶然差错，以及可能存在的潜在隐患。

中华骨髓库HLA分型实验室质控标准中也明确要求实验室做2%抽检工作

4、室内质控的实施

1）室内质控的频次，常规试验每天检测1次质控品和1次阴性空白对照，应对检测标本同时检测。

2）质控品的检测观察指标，HLA定型检测是以定性检验为主的检测，质控结果是否符合预期是衡量检验准确性到底重要依据。

当前有临床意义的方向是哪几个？

1、器官移植

2、输血

3、亲子鉴定

4、疾病诊断

5、脐带血储存前检测

关于亲子鉴定的信息

亲子鉴定是应用医学和人类学的方法检测遗传标记，并依据遗传学理论进行分析，从而对被检者之间是否存在生物学亲子关系所作的科学判定。

1、鉴定人的资格

①必须具备相应的遗传学和分子生物学等学科的知识，

②熟练掌握相应的检验技术，

③由具有一定工作经验的专业人员对检验结果进行解释和判断，并按照国际公认的判断标准作出相应的结论。

2.鉴定机构的条件

①必须是具有相应规模和相应仪器设备的单位；

②实验所用方法必须可靠、操作规范、分型标准；

③试剂必须达到规定的纯度要求、特异性良好；

④仪器必须性能良好、稳定。

此外，目前认为开展亲子鉴定工作的实验室，所检测遗传标记的累积非父排除率至少应在99.95﹪以上。

3.被鉴定人的要求

①必须认真核对被检者身份；

②原则上应由检验者直接从被检者身上采集检验标本，严格避免将被检者或血液样品等调错；

③被检者在近期内不能接受输血，避免他人的血液成分干扰检验结果；

④充分了解被检者是否患有某种特殊疾病。

HLA的检测方法学在临床上是如何看待的？

《抗HLA抗体可改善异基因造血干细胞移植患者的预后》发表于中华血液学杂志2013年9月第34卷第9期提到，抗HLA抗体的检测方法大致有以下四种：补体依赖微量淋巴细胞毒实验（CDC）、流式细胞交叉配型技术（Flow-XM）、酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫磁珠液相芯片技术（Luminex）。

但高灵敏度及操作简便的Luminex 技术可检测抗HLA抗体的特异性，其应成为临床筛选供者的常规检测项目和评价指标。同时移植前后检测抗HLA抗体，可根据抗HLA抗体的特异性和滴度进行相应的预处理，都有助于降低移植失败发生的风险，改善患者预后，提高患者的生存率。

临床论文中提到最多的方法学是哪个？

小编寻找有针对性的论文9篇

1、《抗HLA抗体对肾移植患者移植肾功能的影响研究》

2、《重视组织配型和供者特异性抗体监测在肾移植中的重要作用》

3、《HLA在肾脏移植配型中的应用研究_罗敏》

4、《HLA分型实验室的室内质量控制》

5、《两种方法对HLA-Ⅰ、Ⅱ类分型结果的比较》

6、《组织配型对同种肾移植急性排斥反应的影响》

7、《人类白细胞抗原配型与群体反应性抗体检测在心脏移植中的应用进展》

8、《HLA抗体筛选技术的最新进展及其在器官移植中的应用》

9、《浅谈人类白细胞抗原和抗体检验》

9篇文章之中，仍旧是将免疫磁珠液相芯片技术（Luminex）当做最常用的检测方法。

文章大多数是液态芯片技术( Luminex) ，

采用美国One lambda 公司提供LABScreen Mixed 试剂盒( One Lambda,Inc.,Canoga Park,CA) 进行检测，仪器大多是 Luminex 200或LABcan 100流式细胞仪，样本是血清。

免疫磁珠液相芯片技术（Luminex）详细介绍

传统的蛋白质分析主要采用双抗体夹心ELISA法。此法长期以来被视为蛋白质定量分析的“标准方法”。ELISA可以用来准确测定大批量生物样品，但每次实验只能分析一个目标分子，而不具备同时分析多种目标分子的能力。在ELISA基础上发展出的 luminex技术，不仅同样通过双抗体选择而具有高特异性，同时也具有ELISA的高通量、操作简便、测量准确等优点，而且可以在一次实验中完成对多种目标分子的分析，从而改变了过去的分析模式，建立了更加高效快速的分析平台。

Luminex xMAP技术（液态芯片）有机地整和了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术、计算机运算法则等多项最新科技成果 ，具有自由组合、高通量、高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便、既能检测蛋白又能检测核酸等优点，代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。 在临床诊断中引进流式荧光技术和产品，将极大地提高检测效率和降低检测成本。

技术原理

1. 编码微球：分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6|ìm的聚苯乙烯微球（Beads）染成不同的荧光色，从而获得多达100种经荧光编码的微球；

2. 交联探针、抗体或抗原：把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上；

3. 检测反应：先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合，再加入被检测物。 悬液中的微球与被检测物特异性结合，结合物被标记上荧光物质；

4. 激光分析：微球成单列通过两束激光，一束判定微球的荧光编码；另一束测定微球上的报告分子的荧光强度

技术核心优势

    Luminex xMAP技术（液态芯片）是在后基因组时代发展起来的新一代标准化开放式通用型多指标并行检测平台，它具有以下独特优点：

1. 高通量：微量（10μl）标本，1次检测100个指标；

2. 高速度：最快可达10 000测试/小时；

3. 低成本：液芯联检试剂用量少，降低检测成本；

4. 灵敏度高：检测低限可达0.01pg/ml；

5. 重复性好：每个指标有1000～5000个反应单元，分析100次取平均值，CV值< 5%；

6. 线性范围广：动态范围可达4～6个数量级；

7. 全过程无需洗涤：操作简便、省时省力；

8. 组合灵活：可任选指标构建个性化组合液芯；

9.  通用型生物芯片平台：唯一既能检测蛋白，又能检测核酸的多指标并行检测平台；

平台全开放、配套试剂多：国内外已有50多家公司在开发和推广液态芯片试剂，截止2005年底，已有200多个项目得到了美国FDA的严格认证进入临床使用。

其主要应用范围如下：

1.免疫学或基于免疫学原理进行的分析
- 肿瘤标志物检测
- 细胞因子检测
- 组织分型
- 自身免疫病检测
- 过敏原筛查
- 心血管疾病标志物检测
- 感染性疾病（如乙肝等）的检测

2.DNA杂交分析
- 感染性疾病病原微生物（如HPV等）的检测
- SNP检测
- 基因表达谱分析

3. 基因及蛋白质表达谱分析
- 蛋白质－蛋白质相互作用分析
- 蛋白质－DNA相互作用分析
4. 高通量药物筛选平台
- 高通量、大规模、并行进行药物筛选
- 直接在蛋白水平寻找靶标
- 解释药物的作用机理及毒副作用
5. 受体－配体分析
- 内分泌激素分析
6. 酶与底物的相互作用的研究
- 激酶和磷酸化分析
- 金属蛋白酶类分析

Luminex xMAP与电化学发光比较

Luminex xMAP的Q&A（实时更新）

LUMINEX应用于哪些领域?

生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。

LUMINEX敏感性如何？

灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。

对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？

血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul， 每次可以检测多个蛋白。

从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、Western Blot完全一样。

一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？

检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。 蛋白质检测目前最高可以达到50个左右，基因检测最高达500个。

如何保证检测结果的特异性？

检测的特异性取决于抗体高特异性。 试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。

除了蛋白，LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测？

可以用于基因表达，基因多态性和HLA配型分析。

检测周期多久？

视待测蛋白的种类、数量和标本数量定。一般来说，检测一组蛋白（1-50个，视蛋白种类定）和一组标本（多达360个标）需要3-4小时的操作时间及基本数据分析。但是，检测周期也取决于公司当时的工作量。一般来说，从标本收到起，检测应在1-2周完成；但是部分蛋白试剂盒需要收到订单后从美国进口，检测周期可能会延长到4-5周。

如何判定 LUMINEX数据表达水平差异有无意义？

表达差异主要取决于标本的性质和数量，厂家会为客户提供专业的数据统计服务。

LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?

Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术， 检测对象是蛋白质、DNA等大分子。

普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。

Luminex检测蛋白和标本数目大，是一种高通量检测技术。

普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子，而且检测速度较慢，不适合高通量分析。 由此可见，两种方法应用方向有很大差别。

报告的格式如何？

报告以excel表格形式，包括每种蛋白在每个标本中的表达量。

完成一个LUMINEX的实验,需要的细胞的量是多少?

至少10ul的血清、血浆，蛋白提取物， 或50-100万细胞。

如何控制LUMINEX检测的质量？

我们对每一次检测都设定标准曲线，并设定内参进行校正。厂家会定期做仪器校正，检测精密度和重复性实验以确保检测结果的可靠性。

实验失败有几种原因?

从实验室角度看，成败原因包括试剂盒的质量，待测样品稀释倍数；待测蛋白质低于仪器检测底限，实验操作程序。

从客户角度看，成败取决于样品制备，保存和运输是否恰当。厂家可以提供规范操作程序，供客户参考。

得到实验的结果后, 可以进行那些研究的工作?

可进行多方面的研究，例如：观察不同实验条件对待测蛋白含量的影响，可进行药物作用靶点研究，不同人群血样生物标记物的研究，健康评估，疾病诊断，指导治疗等。

经过分析后，若得到几百个感兴趣的基因或蛋白，如何对这些基因做功能分类或者Pathway相关分析呢？

分析方法与其它技术平台一样，厂家可以提供全套有偿服务。

如何考虑LUMINEX重复实验的问题？

每次都会对使用的标准品和内参做重复性测定，同时也建议对每份样本进行重复2次测定。

在进行LUMINEX实验时，由于经费的限制，是否可以把多个样品进行混合以消除样品的个体差异后再上LUMINEX检测？

不建议这么做。多个样品做检测，计算平均值和误差才有统计学意义。如果多个样品混合后测定只能算1份样品。

客户是组织的样品，准备自己提取样品，请问样品提取方面有没什么技术要求？

需要采用对抗原抗体反应，或者蛋白质抗原性没有抑制作用的提取液进行提取，避免采用会造成蛋白质变性的试剂，如高浓度的尿素或者盐酸胍等。

需要能完全提取待测蛋白质，否则对结果会造成误判。

提取以后需要怎么保存，怎么运输？

建议保存于-80度。避免反复冻融。可用干冰或者至少用冰袋运输。

LUMINEX的假阳性率是多少?

技术性的假阳性率非常低，小于1%。生物假阳性率取决于每个蛋白的生物学特征。

是否可以将同一症状的病例混合后抽提,看共性表达?

可以。混合后的样品将被视作单一样品进行检测。

Luminex xMAP可检测的项目有哪些

LUMINEX蛋白检测平台服务项目

一、细胞因子、化学因子类：

6Ckine/CCL2	BCA-1/CXCL13	CTACK/CCL27皮肤T细胞虏获趋化因子	EGF表皮生长因子
ENA-78/CXCL5  中性粒细胞激活蛋白-78	Eotaxin  嗜酸细胞活化趋化因子	Eotaxin-2/CCL24/MPIF-2嗜酸细胞活化趋化因子-2	Eotaxin-3/CCL26嗜酸细胞活化趋化因子-3
FGF-2  成纤维细胞生长因子-2	Flt-3  ligand FMS样酪氨酸激酶3 配体	Fractalkine  人神经趋化因子	GCP2/CXCL6  人中性粒细胞趋化蛋白2
G-CSF  粒系集落刺激因子	GM-CSF  粒-单系集落刺激因子	GRO生长相关基因蛋白	HCC-1/3/CCL14α/β
I-309/CCL1	IFNα2干扰素α2	IFNγ干扰素γ	IL-10白介素-10
IL-11白介素-11	IL-12  (p40) 白介素-12	IL-12  (p70) 白介素-12	IL-13白介素-13
IL-15白介素-15	IL-16白介素-16	IL-17白介素-17	IL-1ra白介素-1ra
IL-1α白介素1α	IL-1β白介素-1β	IL-2白介素-2	IL-20  白介素-20
IL-21  白介素-21	IL-23  白介素-23	IL-28a 白介素-28a	IL-29  白介素-29
IL-3白介素-3	IL-33/NF-HEV  (mature) 白介素-33	IL-4 白介素-4	IL-5 白介素-5
IL-6 白介素-6	IL-7 白介素-7	IL-8 白介素-8	IL-9 白介素-9
IP-10  干扰素诱导蛋白-10	I-TAC/CXCL11干扰素诱导T细胞趋化因子	LIF白血病抑制因子	Lymphotactin淋巴细胞趋化蛋白
MCP-1(MCAF)单核细胞趋化蛋白1	MCP-2单核细胞趋化蛋白2	MCP-3/CCL7单核细胞趋化蛋白3	MCP-4单核细胞趋化蛋白4
M-CSF巨噬细胞集落刺激因子	MDC/CCL22  巨噬细胞来源的趋化因子	MIG/CXCL9趋化因子9	MIP-1D  (MIP-5/CCL15)巨噬细胞炎性蛋白-1D
MIP-1α巨噬细胞炎性蛋白-1α	MIP-1β巨噬细胞炎性蛋白-1β	MIP-3β/CCL19巨噬细胞炎性蛋白3β	MIP-3α/CCL20巨噬细胞炎性蛋白3α
MMP  -1基质金属蛋白酶-1	MMP  -2 基质金属蛋白酶-2	MMP  -3 基质金属蛋白酶-3	MMP  -7 基质金属蛋白酶-7
MMP  -9 基质金属蛋白酶-9	MMP  -10 基质金属蛋白酶-10	MMP  -12 基质金属蛋白酶-12	MMP  -13 基质金属蛋白酶-13
NAP-2/CXCL7中性粒细胞趋化蛋白2	PDGF-AA  血小板衍生生长因子AA	PDGF-AB/BB血小板衍生生长因子AB/BB	RANTES分泌趋化因子
sCD30  可溶性CD30	sCD40L可溶性CD40L	SCF干细胞因子	SDF-1α+β/CXCL12基质细胞衍生因子-1α+β
sEGFR可溶性表皮生长因子受体	sgp130  可溶性糖蛋白130	sIL-1RI可溶性白细胞介素-1受体I	sIL-1RII可溶性白细胞介素-1受体II
sIL-2Rα可溶性白细胞介素-2受体α	sIL-4R可溶性白细胞介素-4受体	sIL-6R  可溶性白细胞介素-6受体	sRAGE  可溶性晚期糖基化中产物受体
sTNF  RI 可溶性肿瘤坏死因子受体I	sTNF  RII可溶性肿瘤坏死因子受体II	sVEGF  R2 可溶性血管内皮生长因子受体2	sVEGF  R3 可溶性血管内皮生长因子受体3
sVEGF  RI 可溶性血管内皮生长因子受体I	TARC/CCL17胸腺活化调节趋化因子	TGFα转化生长因子α	TIMP-1组织金属蛋白酶抑制剂-1
TIMP-2组织金属蛋白酶抑制剂-2	TIMP-3组织金属蛋白酶抑制剂-3	TIMP-4组织金属蛋白酶抑制剂-4	TNFα 肿瘤坏死因子α
TNFβ肿瘤坏死因子β	TPO 甲状腺过氧化物酶	TRAIL/TNFSF10	TSLP人胸腺基质淋巴细胞生产素
VEGF血管内皮生长因子

二、细胞信号通路类：

Active  Caspase 3 活化半胱胺酸蛋白酶 3	Active  Cleaved PARP活化切割的多腺苷二磷酸多聚酶	Akt/PKB  (Ser473) 磷酸化蛋白激酶B	Akt/PKB  (Thr308) 磷酸化蛋白激酶B
ATF2  (Thr69/71)活化复制因子2	BAD  (Ser112)	CD3ε  (pan Tyr)	c-Jun  (Ser73)
c-Kit  (pan Tyr)	Cleaved  PARP	c-Met/HGFR  (pan Tyr)	CREB  (Ser133)
EGF  Receptor (pan Tyr)表皮生长因子受体	Erb-B2/HER2  (pan Tyr)第二人体表皮生长因子受体	ERK/MAP  Kinase 1/2 (Thr185/Tyr187)	GAPDH
H2A.X (Ser139)	HSP27  (Ser 78)	IGF1R  (pan Tyr)胰岛素样生长因子1受体	IRS1  (pan Tyr)
IκBα  (Ser 32)	JNK  (Thr183/Tyr185)	LAT  (pan Tyr)	Lck  (pan Tyr)
MEK1  (Ser222)	MKK6  (Ser207/Thr211)	MSK1  (Ser212)	p21
p38  (Thr180/Tyr182)	p53  (Ser15)	p53  (Ser46)	p70  S6 Kinase (Thr412)
PDGF  Receptor α (pan Tyr)	Rsk1  (Ser380)	STAT1  (Tyr701)	STAT1  (Tyr707)
STAT2  (Tyr690)	STAT3  (Ser727)	STAT3  (Tyr705)	STAT5A/B (Tyr694/699)
STAT6  (Tyr641)	Syk  (pan Tyr)	ZAP-70  (pan Tyr)

三、神经因子类：

Cortisol	Apo  Al	Apo  CIII	Apo  E
BDNF	Cathepsin  D组织蛋白酶D	Complement  C3	Complement  C4
Complement  Factor H	C  reactive protein (CRP) C-反应蛋白	Melatonin	MIP-4
MPO	NCAM	Neurotensin	Orexin  A
Oxytocin	PAI-1  (total)	PDGF-AA	PDGF-AB/BB
PEDF	Prealbumin	RANTES	SAP
sICAM-1	Substance  P	sVCAM-1	α1-Antitrypsin
α2-Macroglobulin	α-MSH	β-Endorphin

四、骨代谢因子类：

RANKL	Adiponectin脂联素	IL-1β	ACTH
IL-6	Insulin	Leptin瘦素	Osteopontin  (OPN)骨桥蛋白
Osteocalcin	Osteoprotegerin	PTH	TNFα 肿瘤坏死因子α

五、皮肤生长调控因子：

Cortisol	Fibronectin	HSA	Involucrin
LPS	Keratin-6	Keratin  - 1	Keratin  - 10

六、凋亡及败血症因子：

MIF巨噬细胞移动抑制因子	PAI-1  (Total)	sFas	sFasL
sICAM-1	sVCAM-1

七、免疫球蛋白分型：

IgA	IgG1	IgG2	IgG3
IgG4	IgM

八、肿瘤生物标记物：

CA-125癌抗原125	IGF-II  胰岛素样生长因子2	Leptin瘦素	MIF巨噬细胞移动抑制因子
Osteopontin  (OPN)骨桥蛋白	Prolactin泌乳刺激素	MMP-1基质金属蛋白酶-1	MMP-2  基质金属蛋白酶-2
MMP-9基质金属蛋白酶-9	CA  15-3癌抗原检测15-3	Serum  amyloid A血清淀粉样蛋白A	CA  19-9癌抗原19-9
TGFα 转化生长因子α	Cathepsin  D组织蛋白酶D	TNFα 肿瘤坏死因子α	VEGF血管内皮生长因子
VEGFR2血管内皮生长因子受体2	β-2-Microglobulin  β-2微球蛋白	CEA 癌胚抗原	C  reactive protein (CRP) C-反应蛋白
E-cadherin  上皮型钙黏附蛋白	EGFR表皮生长因子受体	Eotaxin  嗜酸细胞活化趋化因子	ER-α 雌激素受体α
Fas(CD95  or Apo-1) 肿瘤坏死因子受体超家族成员6	Ferritin  铁蛋白	Fibrinogen纤维蛋白原	AFP 甲胎蛋白
Follistatin  卵泡素	G-CSF  集落刺激因子3	Haptoglobin  结合珠蛋白	HER-2(erbB2)  第二人体表皮生长因子受体
ICAM-1细胞间粘附分子-1	IGFBP-1胰岛素样生长因子结合蛋白1	IGFBP-2胰岛素样生长因子结合蛋白2	IGFBP-3胰岛素样生长因子结合蛋白3
Angiopoietin-2血管生成素2	LH赖氨酸羟化酶	MCP-1(MCAF)单核细胞趋化蛋白1	MIG/CXCL9趋化因子9
tPSA总前列腺特异性抗原	fPSA游离前列腺特异性抗原	NSE神经元特异性烯醇化酶	Free-β-hCG游离血清人绒毛膜促性腺激素
EB  antibody EB病毒抗体	HE4人附睾分泌蛋白4	CA215癌抗原215	CA242癌抗原242
CA724癌抗原724	CA50癌抗原50	Cyfra  21-1角蛋白19片段	SCCA鳞状细胞癌抗原

九、内分泌激素类：

ACTH	AGRP	Amylin  (Active or Total)	BDNF
CNTF	C-Peptide	FSH	GH
GLP-1  (Active)	Glucagon	IGF-1	IGFBP-1胰岛素样生长因子结合蛋白1
IGFBP-2胰岛素样生长因子结合蛋白2	IGFBP-3胰岛素样生长因子结合蛋白3	IGFBP-4胰岛素样生长因子结合蛋白4	IGFBP-5胰岛素样生长因子结合蛋白5
IGFBP-6	IGFBP-7	Insulin	Leptin
LH赖氨酸羟化酶	Prolactin泌乳刺激素	TSH	Ghrelin  (Active)
GIP  (Total)	PP	PYY  (Total)

十、心血管因子类：

Adiponectin脂联素	Apo  Al载脂蛋白AI	Apo  AlI载脂蛋白AlI	Apo B载脂蛋白B
Apo  CIII载脂蛋白CIII	Apo  Cll载脂蛋白CII	Apo E载脂蛋白E	C  reactive protein (CRP) C-反应蛋白
IFN-γ干扰素-γ	IL-10白介素-10	IL-1β白介素-1β	IL-6白介素-6
IL-8白介素-8	MCP-1(MCAF)单核细胞趋化蛋白1	MMP-9基质金属蛋白酶-9	Myeloperoxidase(MPO)髓过氧化物酶
NT-proBNP氮末端前体脑钠肽	PAI-1  (Total)纤维酶原激活物抑制剂-1	Serum  Amyloid A血清淀粉样蛋白A	Serum  Amyloid P血清淀粉样蛋白P
sE-Selectin可溶性选择素E	sICAM-1可溶性细胞间粘附因子	sVCAM-1可溶性血管细胞粘附因子	TNFα 肿瘤坏死因子α
VEGF血管内皮生长因子

十一、肾脏毒性研究：

Albumin	Clusterin	Cysatin  C	Kim-1
Osteopontin  (OPN)骨桥蛋白	β-2-Microglobulin  β-2微球蛋白	Renin	TFF-3

十二、代谢因子类：

Amylin  (Active)	Amylin  (Total)	Adiponectin	AFP 甲胎蛋白
ANGPTL3	ANGPTL4	ANGPTL6	C-Peptide
FABP1	FGF-19	FGF-21	FGF-23
Ghrelin  (Active)	GIP  (Total)	GLP-1  (Active)	Glucagon
HGF肝细胞生长因子	IL-1β	IL-6	IL-8
Insulin	Leptin瘦素	MCP-1	NGF
PAI-1  (active)	PAI-1  (total)	PP	PYY
Resistin	TNFα 肿瘤坏死因子α