T-SPOT.TB 一场结核分枝杆菌诊断的革命

检验之星

T-SPOT.TB 判断感染结核杆菌新方法

目前结核分枝杆菌诊断主要检测方法有结核菌素皮试、涂片、镜检、分枝杆菌培养、组织病理、结核抗体检测、结核PCR检测等。临床数据显示，不同检测方法对结核分枝杆菌感染的检出率均有一定效果。同时也发现，对于相同的送检标本组织，采用不同的检测方法会出现存在明显差异的检测结果。随着基因工程的不断发展，有力地推动了临床检验从宏观扩展到微观领域，从细胞水平深入到分子水平。研究人员发现效应T细胞被近期暴露的抗原在体外再次刺激后会释放γ干扰素。基于这一研究发现，T-SPOT.TB 检测利用结核特异抗原ESAT-6及CFP-10，通过酶联免疫斑点技术ELISPOT检测受试者体内是否存在结核效应T淋巴细胞，从而判断目前该受试者是否感染结核杆菌（现症感染）。

        T-SPOT.TB 与传统检测方法的比较

        传统的结核分枝杆菌检测方法众多，包括结核菌素皮试、涂片、镜检、分枝杆菌培养、组织病理、结核抗体检测、结核PCR检测等等，但受限于假阳性、假阴性率高，敏感性低，无法区分结核或非结核分支杆菌，操作繁琐实验室要求高等缺点，临床需求仍得不到真正满足。最新的结核分枝杆菌T-SPOT.TB检测是一项通过美国FDA认证，具有具有灵敏度高、特异性高等特点的检测手段，其检测结果不受接种卡介苗与否及免疫力功能是否正常等因素影响，是一项在全球获得广泛认可的结核快速诊断技术，在美国、欧洲等要求极为苛刻的国家和地区，甚至世界卫生组织均推荐其作为结核分枝杆菌感染测试的准则之一，并且入选多国结核病防治指南作为结核分枝杆菌感染诊断的标准。

T-SPOT.TB 准确、可信、快速的结核感染监测

快速：

已知最敏感的T细胞检测技术

最新的科技操作简单

血液检查，无需患者随访

可单人份实验，无试剂耗损

报告时间快

标本保存时间最长可达24~32小时

可信：

应对各种不同免疫功能患者，均可以产生高质量结果

检测结果基本不受免疫抑制影响

非常低的灰区结果（需要重复试验患者）

国内外诊疗指南推荐

准确：

已知全球最精确的结核检测技术

特异性和灵敏度达95%

不受卡介苗接种影响

在移植患者试验中的高灵敏度和高特异性

阳性结果参照以下标准

T-SPOT.TB实验结果包括阴性对照，抗原A，抗原B和阳性对照

空白对照孔斑点数为0～5个且（抗原A或抗原B斑点数)-（空白对照孔斑点数）≥6

空白对照孔斑点数6-10个时且（抗原A或抗原B斑点数）≥2倍空白对照孔斑点数

如果上述标准不符合且阳性质控对照孔正常时，检测结果为“阴性”。

阴性结果

提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。如出现以下情况 ，阴性结果不能排除结核杆菌感染的可能：

1、因感染阶段不同（如标本是在细胞免疫发生前获取的）引起的假阴性结果；

2、少数免疫系统功能不全的情况，如HIV感染者、肿瘤患者、儿童等；

3、以及其它免疫学、实验非正常操作的差异。

阳性结果

提示患者体内存在结核杆菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染。但是否为活动性结核病，需结合临床症状及其它检测指标综合判断。

T-SPOT.TB结果不能作为单独或是决定性的诊断结核病的依据。

虽然ESAT-6和CFP10在所有的BCG菌株，以及绝大多数环境分枝杆菌中缺失，但T-SPOT.TB的阳性结果有可能是堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌的感染引起的。

T-SPOT.TB 在临床中的应用

传染科/感染科

2-3周以上的不明原因发热病人的结核感染排筛免疫力低下患者肺外结核的辅助诊断；

卡介苗接种人群的结核感染筛查；

HIV感染者并发结核的筛查；

T-SPOT.TB不受CD4细胞计数水平的影响，避免了HIV感染后细胞免疫功能受损而导至的假阴性结果；

呼吸科/结核科

呼吸系统疾病与结核鉴别诊断；

胸水/心包积液鉴别诊断；

菌阴肺结核的辅助诊断；

肺外结核辅助诊断；

特殊人群（矽肺等）的结核排筛；

2-3周以上的不明原因发热病人的结核感染排筛。

风湿免疫科

生物制剂/免疫抑制剂治疗前后的筛查；

大剂量激素治疗前后的结核筛查；

自身免疫性疾病与结核病的鉴别诊断；

发热待查患者的结核排筛。

消化科

腹水（结核性腹膜炎）待查；

肠结核的鉴别诊断；

发热待查；

生物制剂治疗前结核筛查（克罗恩病，炎症性肠病）。

儿科

儿童发热的结核感染筛查；

原发性结核的辅助诊断；

儿童肺外结核的鉴别诊断；

卡介苗（BCG）接种-------PPD结果不准确；

儿童肺结核---干咳、不排痰，其他方法很难诊断肺外结核比例高。

其他

骨科：骨结核的辅助诊断；

血液科：血液病患者治疗前后的结核筛查；

肾内科：肾结核的鉴别诊断、血透患者的结核筛查；

神经内科：颅内结核的辅助诊断；

内分泌科：糖尿病患者的结核排筛。

T-SPOT.TB 诊断结核感染临床应用进展

T-SPOT.TB是一种C干扰素释放分析，用酶联免疫斑点技术检测对6 kD早期分泌靶向抗原和10 kD培养滤过蛋白肽段库反应的T 细胞以诊断结核感染。其具有高度的敏感性和特异性， 不受机体免疫力及卡介苗接种的影响。在欧洲及美国，T-SPOT.TB已被批准应用于临床， 其越来越多的研究用于鉴别活动性结核与潜伏性结核感染， 预测结核发病风险等。

结语

T-SPOT.TB用于结核分枝杆菌感染的检测在国外已有多年临床运用，取得了良好的临床效果，并且入选了一些发达国家包括美国的结核病防治指南，被作为结核分枝杆菌感染检测的重要手段之一。国内开展这一项目检测稍晚，已公开的国内相关临床数据有限，更大规模的临床证据收集及论证仍有待奋斗在一线的临床工作者的完善。目前，国内实力较雄厚的医院大多均有或准备开展此项检测，而作为独立的第三方医学检验机构目前已知艾迪康、迪安、金域等均有实力开展此项检测。沿着T-SPOT.TB检测采取的思维路径，他是否会给国内的结核分枝杆菌检测带来一场革命？让我们拭目以待。也希望此项技术能为我们国内的大众健康带来更多惊喜，祝愿他在国内获得美好的未来！

来源：中华检验医学网