干货分享 ▎常见的微生物培养基

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培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。而其中微生物培养基根据微生物的种类和实验目的不同也有不同的种类和配制方法，下面介绍几种常见的微生物培养基。
1、营养琼脂培养基
营养琼脂培养基其实就是一种无选择性的较低营养成分的固体培养基，主要用于细菌菌落计数，也可以用于细菌的传代和增菌，但一般不用于细菌的鉴定（除非该细菌菌落有比较特殊的形态特征）。
营养琼脂培养基配方（每升）：蛋白胨10g，牛肉膏粉3g，氯化钠5g，琼脂15g，最终pH 7.3±0.2。蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源，氯化钠能维持均衡的渗透压，琼脂是培养基的凝固剂。


2、胰酪大豆胨琼脂培养基
胰酪大豆胨琼脂培养基又称为TSA培养基，是一种基本的非选择性培养基，含有胰酪蛋白胨、大豆胨、氯化钠和琼脂成分，主要用作无菌检验及一般微生物的培养。在国标中通常用来做医药工业洁净室（区）沉降菌的测试。在待测区域内选取测试点，将TSA平板打开，布置在测试点，在空气中暴露30min以上不等时间进行采样，然后培养进行菌落计数，不同的洁净度等级要求不同的菌落数。
胰酪大豆胨琼脂培养基配方（每升）：胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物)15g、大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物)5g、氯化钠5g、琼脂15g，最终pH7.3±0.2。



3、LB琼脂培养基LB琼脂培养基为一种实验室中广泛使用的普通培养基。主要成分为胰蛋白胨、酵母提取物、琼脂、氯化钠。LB培养基通常用来培养基因工程受体菌（大肠杆菌），这类菌通常是经过改造无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌。培养这类工程菌，我们可以表达大量的外源蛋白，因此LB培养基通常在基因工程、分子生物学中使用比较多。LB琼脂培养基配方（每升）：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂15-20g，最终pH7.4±0.2 。



4、PDA培养基PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。它属于固体培养基、半合成培养基。PDA培养基有利于微生物生长发育，并且节省原料，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。PDA培养基配方(每升)：土豆200g，葡萄糖20g，琼脂15-20g，自然pH。



5、伊红美蓝培养基
伊红美蓝培养基通常简称EMB medium，为弱选择性培养基，主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别，也适用于大肠菌群的分离培养。
伊红美蓝培养基配方（每升）：蛋白胨10g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g、琼脂20-30g，2%伊红水溶液20ml，0.5%美蓝水溶液13ml
其配方中各主要成分的作用为：蛋白胨提供碳源和氮源；乳糖是大肠菌群发酵的糖类；磷酸氢二钾是缓冲剂；琼脂是培养基凝固剂；伊红(Eosin Y)也称曙红或四澳荧光素，为酸性染料；美兰(eosin-methylene blue)，也叫亚甲蓝(C16H18N3S.CI)，为碱性染料，二者在培养基中均为指示剂。
其原理是：当大肠杆菌分解乳糖产酸时，细菌带正电，所以染上红色，再与美兰结合而形成紫黑色菌落，并带有金属光泽；产气肠杆菌则呈棕色，很少有金属光泽，同时不分解乳糖的细菌，如沙门氏菌和志贺氏菌，则为无色或琥珀色半透明菌落；凝固酶阳性葡萄球菌为无色针尖大小的菌落；白色念珠菌则为蛛丝状或羽毛状菌落。



6、麦康凯琼脂培养基
麦康凯琼脂培养基简称为MAC培养基，具有中等强度选择性，抑菌能力略强，主要抑制革兰氏阳性菌，但有少数革兰氏阴性菌也不生长，用于分离鉴定细菌的培养基。主要成分为蛋白胨、脙胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐) 氯化钠、琼脂、乳糖、1%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液。
其原理是：胆盐可以抑制革兰氏阳性菌的生长，对伤寒等沙门菌的生长有促进作用。中性红可以把能分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开，呈现不同颜色。沙门菌及志贺菌呈无色菌落，大肠埃希菌呈桃红色菌落。



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