【百欧泰生物】聚集诱导发光（AIE）荧光探针制备详解

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聚集诱导发光（aggregation-induced emission, AIE）材料具有良好的生物安全性、优异的光学性质、出色的光敏性能、独特的单分子多功能性以及易于合成和功能化修饰等特点，在食品质量控制、健康诊断、生物成像、光学诊疗等领域受到青睐。基于AIE材料的体外诊断产品，如即时免疫检测产品已被开发出来。相较于传统的荧光材料，AIE材料在聚集态或固态时发光显著增强，弥补了传统荧光材料存在的聚集导致淬灭（ACQ）缺陷，更能满足高灵敏度和准确度检测的需求。

AIE荧光微球是将AIE荧光分子包裹在聚苯乙烯微球中而制备的高性能标记材料，具有荧光效率高、荧光稳定性好、抗光漂白能力强等特点。在微球表面可以定量修饰功能基团或者生物大分子（羧基、氨基、羟基、链霉亲和素等）作为免疫分析的连接基团，使得AIE荧光聚苯乙烯微球具有广泛的应用，包括侧向层析技术、细胞成像、微流控技术和荧光酶联免疫吸附等等。AIE免疫层析产品具有高灵敏度、高准确性和高可靠性等特点。
聚集诱导发光（AIE）荧光探针制备方法
（1）聚集诱导发光微球（AIEMs）的制备
①准确称取AIE染料和聚马来酸酐十八醇酯（PMAO）充分溶解于氯仿中形成有机相；
②将有机相溶液加入到十二烷基硫酸钠（SDS）水溶液中；
③将混合溶液于超声破碎仪中乳化2 min，再加入超纯水，60°C挥发30 min，去除有机相；
④残留的水相溶液在13500 rpm条件下离心15 min，收集沉淀物；
⑤将收集到的沉淀物重悬于NaOH溶液（pH=10）中静置24小时，以充分水解酸酐成羧酸；
⑥水解后溶液在13500 rpm条件下离心15 min以去除上清液，沉淀复溶于超纯水中。
（2）聚集诱导发光微球探针的制备
①取干净的玻璃进样瓶，分别加入PB缓冲液以及AIEMs，再逐滴加入OTA腹水，超声混匀，在室温下震荡反应15 min；
②加入EDC，混匀后继续震荡反应30 min；
③重复此操作三次，使AIEMs与OTA腹水充分反应；
④反应结束后，加入酪蛋白反应1 h，以封闭AIEMs上未反应的羧基位点；
⑤将上述溶液在13500 rpm条件下离心15 min，沉淀重悬于PB复溶液（含25%蔗糖和0.1%叠氮化钠），4°C保存备用。


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参考文献
[1] 陈国欣.基于聚集诱导发光微球的荧光免疫层析技术定量检测真菌毒素[D].南昌大学,2023.DOI:10.27232/d.cnki.gnchu.2023.003878.
[2] Gao, M., Tang, B.Z. (2017). Fluorescent sensors based on aggregation-induced emission: recent advances and perspectives. ACS sensors. 2(10), 1382-1399. https://doi.org/10.1021/acssensors.7b00551

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