必看！细胞污染 “绝症”，这招竟能妙手回春

生物科研实验室

一、细菌污染
    
    细菌污染会使培养基从清澈变得浑浊，颜色可能会呈现黄色变化，同时可以观察到贴壁细胞脱落并死亡。在显微镜下，污染常表现为黑色细沙状的细菌，这些细菌可能呈现球形、杆状等不同形态。污染会显著影响细胞的生长，并可能导至培养液散发出异味。解决办法：
在进行细胞传代时，可以用1xPBS轻柔地多次清洗细胞，以去除污染。
根据需要，在培养基中按比例添加抗生素以抑制细菌的进一步生长。然而，应密切监测抗生素的浓度，以免对健康细胞造成不利影响。
二、真菌污染
    
    真菌污染时，培养液通常保持清亮的状态，但细胞生长速度明显减缓，并可能在培养液中出现白色或浅黄色的漂浮物。在显微镜下，真菌通常表现出丝状、管状或链球状的菌丝结构。解决办法:真菌污染在早期较难发现，一旦确认感染源是真菌，建议果断舍弃整个培养，以防止污染扩散并影响培养箱内的其他实验。
    为避免真菌大范围传播，建议在每次培养后对培养箱内的环境进行严格的消毒和清理。在每次实验设置中，应尽可能使用无菌材料，并审慎关注培养基的来源及制备过程。
三、支原体污染
    
    支原体污染的培养液通常不表现出浑浊现象，但细胞生长可能减缓，并可能在形态上发生变化，例如出现拉丝或铺展的情况。在显微镜下，支原体污染常表现为小黑点，这些小黑点基本保持静止不动。解决办法:针对支原体污染，可以使用专门设计的支原体清除试剂进行处理。然而，支原体污染通常较难根除，还容易传播到其他健康的细胞中。
因此，重新复苏未受污染的细胞并进行新的培养是更为稳妥的方法。在进行新一轮细胞培养时，应加强对实验环境和设备的无菌管理，通过定期检测及时识别污染情况。
四、黑胶虫污染

    黑胶虫污染时，培养液通常保持其颜色和透明度，不会表现出显著的浑浊。在显微镜下，可观察到黑色点状或片状的结构，这些黑点以布朗运动的形式存在。
解决办法：目前普遍认为，黑胶虫污染与血清质量存在密切关联。虽然更换血清可能是一种解决方案，但考虑到其高成本，这通常不是首选方法。实验室遇到黑胶虫污染时，通常使用专门的黑胶虫去除剂来处理污染问题。这些药剂在应用后可以迅速有效地清除黑胶虫污染，确保细胞培养的正常进行。