WB实验屡战屡败？或许问题出在抗体保存上！

生物科研实验室

WB（免疫印迹）、免疫荧光等实验中使用的抗体通常价格不菲，收到抗体后，我们该如何妥善处理呢？今天就来和大家聊聊这个话题。

  1. 离心处理

收到抗体产品，不论是液态还是粉末形态，首先切勿急于打开盖子。由于运输途中的颠簸和震动，抗体可能会附着在容器壁或盖子上。为防止抗体在开盖时散落或飞溅，应直接将抗体管进行离心。建议的离心条件为10,000克（g）离心力，离心时长不少于20秒。离心有助于将可能分散的抗体成分聚集到管底，便于后续准确取用。由于抗体液体通常透明，且管壁上贴有标签，肉眼难以观察管内液体或粉末的确切位置，离心后能更准确地评估抗体的分布。

  2. 分装存储

分装能有效减少温度变化对抗体活性的不利影响，并降低因多次从同一管中吸取抗体而造成的污染风险。

  • 分装适用于大体积抗体（如50-100微升）；

  • 分装量以一次实验用量为宜，但每份最少不应少于10微升。分装体积越小，抗体浓度越易受蒸发和管壁吸附的影响。

  3. 保存温度

许多抗体溶液中含有高达50%的甘油，这显著降低了其冰点，一般认为其冰点约为-23℃。考虑到甘油对冰点的影响，-20℃通常被视为储存含甘油抗体的理想温度，可防止抗体结冰。然而，-80℃下保存含甘油的抗体可能并非最佳选择，因为低于冰点的温度可能导至抗体结构变化，甚至形成无法识别目标抗原的聚集体。不同抗体的添加剂成分可能不同，因此保存温度要求也可能有所差异。为确保抗体的稳定性和活性，务必遵循制造商提供的官方说明书中的保存温度指南。若需长期保存，某些抗体可能需在更低温度下保存，如-70℃或液氮中，以保持最佳性能。短期内使用的抗体可在4℃下短期保存，但长期存放仍建议采用推荐的低温条件。

  4. 保存位置

抗体应存放在温度稳定的环境中，避免频繁的温度波动，因为温度变化可能影响其结构和功能。建议将抗体存放在冰箱内部区域，而非门上的架子或易受开关门影响的位置。频繁开关门会导至冰箱内部温度波动，可能对抗体的稳定性造成不利影响。因此，应选择相对不易受这些活动影响的位置。分装后的抗体应记录详细信息，并统一放置在固定位置，便于管理和使用。