【高中生物】利用分光光度计检测溶液中的蛋白质含量——双缩脲法

幸福侠侣

蛋白质检测是高中生物必修一第二章第一节的内容，本实验在教材原有定性检测的基础上进行拓展，利用双缩脲试剂及分光光度计定量的测定溶液中的蛋白。


原理
蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物，在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈现正比关系。
实验目的

• 学会使用威尼尔分光光度计制作标准曲线
  
• 掌握朗伯比尔定律的应用
  
• 掌握双缩脲试剂的配制方法
  

试剂配置
1. 蛋白标准品的配制
称取1g结晶牛血清蛋白溶于100mL蒸馏水中，充分搅拌，制成10mg/mL的蛋白标准液
2. 双缩脲试剂的配制
称取硫酸铜0.15g，酒石酸钾钠0.6g分别加20mL蒸馏水溶解，然后将二者混合。边搅拌边加入10%氢氧化钠30mL。全部倾入100mL容量瓶中,混匀。以蒸馏水定容至刻度线。
（酒石酸钾钠的存在可使硫酸铜不会与氢氧化钠反应产生沉淀，若需要长期储存可加入碘化钾）
3. 配制不同浓度的蛋白标准液
根据下面表格加入试剂，配制浓度为0mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL、10mg/mL的蛋白标准液




具体 实验步骤及结果请关注【盛夏教育】

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