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在质谱分析中,
SIM
、
MRM
、
SRM
和
PRM
是常用的定量技术,它们在目标分析物的选择性、灵敏度和应用领域等方面有所不同。尽管它们的原理相似,都依赖于选择性监测特定离子信号来进行定量,但它们各自的工作模式、适用范围和优缺点有所区别。
1
.
SIM(Selected Ion Monitoring)选择离子监测
SIM
是最基础的质谱定量技术,通常使用于
单四极杆质谱
(Single Quadrupole MS)中。SIM 只选择并监测一个特定的离子的信号强度,用于单一目标的定量分析。
原理:
SIM 模式下,质谱仪选择一个特定的离子(通常是母离子),然后通过质谱仪收集该离子的信号强度。
这种方法没有涉及母离子和子离子对的反应,仅监测一个离子的强度。
应用:
适用于分析单一目标物质。
适用于简单样品或目标离子浓度较高的样品分析。
优势:
灵敏度高,适用于低浓度分析。
操作简单,适合快速分析单一化合物。
局限:
只能监测单一目标离子,无法进行多目标分析。
对背景干扰较为敏感,适用于目标离子浓度较高的样品。
2. MRM(Multiple Reaction Monitoring)多反应监测
MRM
是一种常用于
三重四极杆质谱
(Triple Quadrupole MS)的多重反应监测技术,适用于同时定量多个目标化合物。它通过选择母离子和子离子对的反应进行监测,具有更高的选择性。
原理:
MRM 模式下,质谱仪首先选择目标分子的
母离子
(Parent Ion),然后通过碰撞诱导解离(CID)生成
子离子
(Product Ion),并在第三个四极杆中选择并监测这些子离子的信号。
可以同时监测多个目标物质的母离子和其对应的子离子对。
应用:
适用于复杂样品中的多目标定量分析,广泛应用于环境、临床、食品安全和药物分析等领域。
优势:
高灵敏度和选择性,能够同时监测多个目标物质。
可以有效抑制背景干扰。
局限:
需要预先知道目标物质的母离子和子离子的反应信息,并进行方法开发。
3. SRM(Selected Reaction Monitoring)选择反应监测
SRM
和
MRM
基本上是相同的技术,只是术语不同。SRM 更常用于早期文献中,而 MRM 在现代应用中更为普遍。SRM 和 MRM 都是通过选择母离子和子离子对的反应进行定量分析,通常用于
三重四极杆质谱
。
原理:
SRM和MRM 都选择
母离子
和
子离子
反应,通过两级或三极质谱系统来选择和监测目标化合物。
应用:
与MRM 一样,SRM 适用于多目标分析,广泛应用于复杂样品的定量分析。
优势:
高灵敏度和高选择性,适用于复杂样品。
局限:
和 MRM 一样,SRM 需要事先知道目标物质的母离子和子离子的反应信息。
4. PRM(Parallel Reaction Monitoring)平行反应监测
PRM
是
MRM
的扩展,通常应用于
高分辨率质谱仪
(如 Orbitrap )。PRM 不仅选择母离子和子离子对,还可以同时监测多个碎片离子反应,从而提供更多的信息和更高的选择性。
原理:
在 PRM 模式下,质谱仪选择一个目标
母离子
,然后通过高分辨率质谱技术(如 Orbitrap )同时监测该母离子产生的多个碎片离子。
PRM 模式通过更高的分辨率提供多个碎片离子的信息,可以提高数据的准确性和可靠性。
应用:
适用于蛋白质组学、代谢组学等复杂样品中的定量分析,尤其是在需要高分辨率和灵敏度时。
特别适用于高分辨率质谱平台。
优势:
高选择性和灵敏度,能够提供更多的碎片离子信息,从而提高定量的准确性。
可以同时监测多个碎片离子,提高数据的可信度。
局限:
需要高分辨率质谱设备(如 Orbitrap ),对仪器要求较高。
方法开发较复杂,操作要求较高。
SIM、MRM、SRM 和 PRM 的主要区别
总结
SIM
是最基础的模式,适用于分析单一目标离子,常用于单四极杆质谱,适合简单样品。
MRM
和
SRM
本质相同,都是通过选择母离子和子离子对的反应进行监测,适用于三重四极杆质谱,适合多目标分析。
PRM
是 MRM 的扩展,使用高分辨率质谱技术,能够同时监测多个碎片离子,适用于复杂样品和高灵敏度的分析。
原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/12476213785
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