蛋白测定方法比较：定量技术的优缺点及应用选择

wolf

一、概述
在生物科学研究和临床医学实践中，对蛋白质以及其含量的精确测定是至关重要的。这一切都源于蛋白质在细胞生物学和人体健康中的关键角色。因此，设计一种在各种情况下均可行且准确的蛋白定量方法是科学家们长期致力的目标。让我们一起深入探讨并比较不同的蛋白测定方法，以揭示其各自的优缺点和最适应用场合。


图1
二、色谱分析法
色谱分析法是蛋白质定量的常见方法之一，其优点在于具备低限定、高灵敏度和精确度，计数准确，可以对复杂样品进行深入了解。
然而，这种方法的缺点也是显而易见的：需要专门的设备和时间来运行实验，且费用较高。此外，由于需要对每种蛋白质进行标定来获得准确数据，因此，其使用范围在一定程度上受到限制。
三、Bradford蛋白测定法
Bradford蛋白测定法是一种经典的蛋白质定量方法，通过与布氏杂色素作用，可以测量蛋白质总量。
该方法的优点是速度快、易于操作、耗材少且不需要昂贵的设备。然而同样，这种方法不能区分蛋白质及其修饰，针对性较差，因此在精确度面前，其应用场景也受到了一定的限制。
四、Lowry测定法
Lowry测定法是另一种实验室中常用的蛋白测定方法。其优点在于宽测定范围，并且准确度相对较高。
尽管如此，Lowry测定法的应用受到许多因素的影响，如缓冲液的成分、离子浓度等，对操作要求也较高。并且，与Bradford法相比，Lowry方法所需时间较长。
五、BCA法
BCA法是一种更现代的蛋白测定方法，能够精确对蛋白进行定量。其主要优点是可以受益于Bicinchoninic acid（BCA）的存在，对蛋白质的浓度趋势具有很好的反应。
尽管如此，BCA法对部分物质如糖、脂肪酸、氨基酸等的干扰性较强，不同溶液对最终结果也可能产生影响，因此在实际应用中需考虑其可能的局限性。
六、结论
了解和掌握以上各种蛋白质测定方法的优点和缺点，能够帮助我们全面评估在特定应用中选择哪种方法最为合适。每种方法都有其独特的优点，但也有其适用性的局限性，因此，在采用任何一种方法之前，都需要进行充分掌握和理解，以确保测定结果的准确性。

原文地址：https://zhuanlan.zhihu.com/p/681744716