文章来源：中华检验医学杂志, 2025, 48(11): 1396-1411. 作者：中国康复医学会血液病康复专委会 浙江省健康服务业促进会血液转化专委会 摘要 毛细管电泳免疫分型（IT）融合了毛细管区带电泳高效分离技术和免疫消减法，对单克隆免疫球蛋白（M蛋白）进行鉴定和分型，是新一代的电泳技术，已在临床检验中获得广泛应用，并展现了其独特的价值。然而，IT的实验室检测流程和结果解读存在多样性，缺乏统一的标准规范，导至不同检测单位在结果描述和报告书写上存在差异，进而影响了结果的规范性和严谨性。此外，在M蛋白相关疾病的诊断和治疗中，尚缺乏明确的检验指导和统一的临床应用指南。本共识旨在提高IT实验室检测结果的准确性和一致性，推动实验室检测的规范化和同质化，实现检验结果的互认互通，促进其在临床诊治过程中的有效应用，为临床医生提供明确的检验指导和应用指南。 毛细管电泳免疫分型（capillary electrophoresis immunotyping，IT）作为新一代的电泳技术，融合了毛细管区带电泳的高效分离技术与免疫削减法，对单克隆免疫球蛋白（monoclonal immunoglobulin，M蛋白）进行精准鉴定与分型 ［ 1 ］ 。该技术以其高分辨率、高灵敏度和操作简便性 ［ 2 ］ ，在临床检验中得到广泛应用，并展现了其独特的价值。然而，当前IT技术在实验室检测流程和结果解读方面存在多样性，缺乏统一的标准规范，导至不同检测单位在结果描述和报告书写上存在差异，影响了结果的规范性和严谨性。此外，IT在单克隆免疫球蛋白相关疾病（monoclonal immunoglobulin related disease，M蛋白相关疾病）的诊断和治疗中的应用尚缺乏明确的检验指导和统一的临床应用指南，这无疑增加了其临床应用的不确定性，也影响了对患者诊疗的精准性与有效性。本共识旨在提升各实验室IT检测结果的准确性和一致性，推动实验室检测的规范化和同质化，实现检验结果的互认互通，进一步推动IT在临床诊治过程中的有效应用，为M蛋白相关疾病的诊断与治疗提供更为科学、可靠的检验依据，提高诊疗质量，为患者提供更优质的医疗服务。 一、共识发起机构与专家组成员 本共识由浙江大学医学院附属第一医院血液科牵头，联合国内多家医疗机构及相关学组共同制定。专家组成员来自全国26个省区市的88家医疗机构，共132位专家，其中临床专家24位，检验专家108位。 二、共识制订过程 共识制订分为3步。第1步，2024年1月启动制定IT的实验室检测规范团体标准，经过多轮修改、评审、公开征求意见等环节，于2024年11月8日发布，12月8日实施。在此过程中，各领域专家深入实践、充分了解技术应用，形成若干共识初稿。第2步，开展《M蛋白鉴定和分型实验室室间比对》活动，以江浙地区开展IT的单位为主，同时兼顾全国东西南北的区域覆盖，优选全国20家代表性医疗机构，验证技术的可行性和规范性，并在实践中商讨出具有检验和临床意义的共识。第3步，在全国范围内实施和推广该团体标准，检验和临床专家们进行多轮次讨论及文献检索，依照《中国制订/修订临床诊疗指南的指导原则（2022版）》 ［ 3 ］ 进行制定，并在国际实践指南注册平台上注册（PREPARE-2025CN357）。 三、证据的检索和推荐意见分级 专家组围绕IT实验室检测与临床应用两大核心问题，系统构建检索策略，以“M蛋白（monoclonal immunoglobulin）”为核心关键词，涵盖毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）、免疫固定电泳（immunofixation electrophoresis，IFE）、IT等技术方法，多发性骨髓瘤以及轻链型淀粉样变性等M蛋白相关疾病筛查、诊断及疗效监测应用，以及检测性能评估、标准化流程、结果解读等环节，通过中英文多个数据库检索近15年（2010—2025）发表的文献，包括PubMed、Web of Science、中国知网、万方与维普等数据库，运用布尔逻辑运算及筛选策略，优先纳入高质量临床研究、系统综述，及国内外指南，以确保纳入证据的科学性、时效性与代表性，最终实现对国内外研究进展的系统性评估与证据整合。检索时间截至2025年4月。 专家组成员经过讨论与修改后，初步形成实验室检测专家共识10条，临床应用共识7条，根据推荐意见分级的评估、制订及评价分级（grades of recommendation，assessment，development，and evaluation，GRADE）方法，专家组对共识条目进行多轮投票表决（强或弱、赞成或反对），最终达成IT实验室检测专家共识7条，临床应用共识5条，并制定完善的推荐意见分级（ 表1 ）。
一、适用范围 本共识适用于各级医疗机构临床检测实验室，第三方检测机构，科研实验室等进行IT检测的相关机构。本共识适用于各级医疗机构临床医生或相关医务工作者。 二、术语和定义 （一）IT 融合了毛细管区带电泳高效分离技术和免疫消减法，对M蛋白进行鉴定和分型，是近些年新出现的电泳技术。 （二）M蛋白 又名副蛋白或M组分，由重链和轻链通过二硫键结合形成的单克隆完整免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）和/或单克隆游离轻链（free light chain，FLC）组成 ［ 4 ］ ，是单克隆浆细胞异常增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。 （三）寡克隆区带 在病理免疫情况下，因少数克隆性浆细胞异常增生合成一些免疫球蛋白，免疫电泳检测时形成的2条以上分离且较狭窄的不连续区带，也称为寡克隆条带或寡克隆峰型。出现寡克隆区带提示发生了体液免疫反应，与感染、自身免疫疾病、移植等有关。 （四）检测效力 检测方法的准确性、可靠性和有效性，即其能够准确识别、测量或评估目标对象的能力。 一、IT实验室检测 M蛋白是由浆细胞或B淋巴细胞单克隆恶性增殖所产生的，在血液系统疾病的诊断和治疗及预后评估中占有重要地位，是多种浆细胞疾病如多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）诊断、疗效判断和疾病复发的重要指标之一 ［ 4 ］ 。目前临床上已广泛开展M蛋白鉴定和分型的检测项目，各家检测实验室使用的检测方法主要有传统的IFE和新一代IT ［ 5 ］ 。IT是利用免疫消减法来确定血清或尿液样本中M蛋白的存在，并鉴定其重链和轻链类型。其与传统的检测方法相比具有分析时间更短，基线噪声低等优点，且在多克隆背景较高时对微弱的M蛋白识别会更清晰。IT自动化程度高，简化了实验过程，使操作更加方便快捷，已得到临床实验室的认可。 随着IT技术的革新，各检测单位在检测流程、质量控制、结果判断与报告等方面出现了主客观差异，导至实验结果不一致，甚至出现误读误判、假阴性或假阳性等问题，影响了临床结果解读的可靠性。为解决上述问题，本共识旨在指导和规范实验室的检测及结果解读工作，提升检测结果的准确性和一致性，减少标准不统一而导至的医疗资源浪费。经过专家组充分研讨，最终形成以下7条实验室检测共识。 共识1 实验室在开展IT检测时，在毛细管电泳仪器安装时需确认装机条件、正确的参数设置、进行性能验证（包括配套的软件的数据验证）；需明确样本的采集、处理及保存条件；在检测实施过程中应依照建立的标准操作规程进行设备操作、质控品与样本检测、结果判读与存储；建立完善的质量控制体系，对整个检测过程进行监控，质控数据与原始图谱需至少存档2年（强推荐，高级别证据）。 （一）样本采集、保存及处理要求 实验室应制定样本采集规程并按规程进行血清和尿液样本的采集。 1. 血清样本的采集、处理及保存：血清样本宜采集新鲜的血液，必须按照临床实验室检测的既定规程进行采集。血清样本在2~8 ℃冷藏保存时间不应超过10 d。若要长期储存，血清样品应在采集后8 h内冷冻（‒18/‒30 ℃）保存，冷冻的血清可以稳定保存3个月。血清应储存在 2~8 ℃ 的条件下，储存于15~30 ℃时会出现β2组分降解并逐渐减少，还可能失效（C3补体降解后，γ侧和/或β1会出现额外的组分），而α2组分降解时其区带形状稍有改变。血清样本在分析前应观察血清特征。冷藏、冷冻保存的未稀释的血清样本，恢复至室温后可直接分析使用（复融样本须充分混匀后方可进行分析）。血清样本可根据免疫球蛋白总浓度进行稀释处理。 避免使用溶血（血红蛋白浓度<2 g/L）样本，存在冷球蛋白或浑浊（三酰甘油浓度<41 mmol/L，胆红素<342 μmol/L，类风湿因子<981 IU/ml）等现象的血液，不宜使用血浆样本。接收到的样本需在规定的时间内进行处理，同时，样本的保存时长应符合相关要求，避免反复冻融。 2. 尿液样本的采集、处理及保存：尿液样本宜采集24 h以内的尿液。尿液样品必须按照临床实验室检测的既定规程进行采集。尿液样本在2~8 ℃冷藏保存时间不应超过7 d；在‒70~‒80 ℃冷冻保存，时间不应超过1个月。不能将尿液样本在‒18/‒30 ℃及室温保存。解冻或储存不当的样品可能会因蛋白质降解而使条带发生变化或出现额外条带，影响检测结果判读。在进行尿液免疫分型检测前需对尿液样本进行处理，尿液样本的处理包括透析和浓缩2个步骤，定量待分析尿液样品中的总蛋白浓度（以1~3 g/L浓度为例），取5 ml纯尿4 300× g离心10 min，取上清液约0.5 ml，与19.5 ml蒸馏水或去离子水混匀后，加入透析系统管［具有截留分子量为1万，即相对分子质量阈值为10 000的（聚醚砜）膜，20 ml试管］，4 000× g离心40 min，取上层液体约0.5 ml，与20 ml透析缓冲液混匀后，加入另一同类透析管内，再次4 000× g离心40 min，最终获得上层液体约0.5 ml，用于上机分析。处理后的尿液样本可置于微型试管中，在2~8 ℃中冷藏保存，并在24 h内检测分析。尿液样本离心处理后不应在透析系统中储存。 （二）毛细管电泳仪检测设备装机确认及参数设置验证 毛细管电泳仪运抵实验室后需按照设备厂商提供的安装场地及技术要求，进行安装调试，包括配套软件分析。在不改变厂家所设定的参数前提下，在毛细管电泳仪正常使用之前需完成性能验证，依据CNAS-GL038-2019《临床免疫定性检验程序性能验证指南》要求，完成符合率、精密度（重复性）、检出限等性能进行验证。若改变厂家所设定参数，则需要对设备进行相关性能确认。 在进行检测前需对检测设备的参数、检测所需耗材进行核对、样本核对，依既定的标准操作程序（包括配套软件数据分析）完成检测操作。电泳仪检测完成后，应使用配套软件进行毛细管电泳免疫分型结果分析。实验室宜连接相应的报告系统软件，实时传输IT检测报告。 （三）检测质量控制 样本采取唯一条形码标注患者ID、采样时间、样本类型（血清/尿液）、采样人员等信息，并录入实验室信息管理系统（laboratory information system，LIS）进行追溯管理。 将检测结果录入LIS系统，生成检测报告，包括原始图谱、仪器设备、试剂和耗材、质控结果、操作人员及审核人员签名等信息。质控数据和原始图谱至少存档2年，原始图谱建议长期保存（电子化备份）。LIS系统应具备综合分析和保存等功用，能为持续提高IT检测项目的检测质量服务。在检测过程中和检测后，如需要对样本的结果进行追溯，可通过患者ID或样本号检索全流程数据。 共识2 建立完善的室内与室间的质控管理体系。开展IT检测的实验室应进行室内质量控制及室间比对。每次样品检测前，应同时进行室内质控样本检测，室内质控样本应具有均匀、稳定及有效等特点，建议定期参与室间质量评价活动，如无法参与室间质量评价活动，需与其他医院进行室间比对（至少3家医院参与比对，符合率要求≥80%），以确保检测质量与结果可靠性（强推荐，高级别证据）。 （四）室内质量控制 毛细管电泳免疫分型可采用试剂厂商提供的质控品或患者数据完成室内质控监测。如使用试剂厂商提供的质控品（需获得国家药品监督管理局注册），其质控品应涵盖所检测的5种免疫球蛋白抗原（即IgG、IgA、IgM的重链部分以及轻链κ和λ部分的抗原）。质控品需包括含有M蛋白组分的阳性质控品和含有多克隆免疫球蛋白组分的阴性质控品。 患者样品中的免疫球蛋白（不论多克隆或者单克隆）会与对应抗体结合形成免疫复合物，可用来监控实验的有效性。毛细管电泳免疫分型为定性实验，可使用含有M蛋白的样本作为阳性质控，以及含有多克隆免疫球蛋白的样本作为阴性质控。作为阴、阳性质控的检测结果与预期的阴性、阳性质控品结果一致即表明在控，相反则为失控。推荐使用国家药品监督管理局批准的试剂和质控品，质控品的检测与受检标本采取相同的操作步骤，用于监测实验的稳定性。建议每次样品检测的同时进行室内质控检测。对质控结果进行详细的分析和记录，如有异常应及时查找原因并采取措施进行纠正 ［ 6 ］ 。 （五）室间比对 实验室需要定期进行室间比对，如无国家或省级室间质评，可自行组织实验室间的比对活动，以确保检测结果的准确性和一致性，识别实验室存在的问题与实验室间的差异。至少3家以上医院参与比对，符合率要求≥80%。根据室间比对结果和反馈意见，不断改进实验室的检测技术和质量控制体系，提高检测结果的准确性和可比性 ［ 6 ］ 。 共识3 IT结果判读基于将目标抗体泳道图谱叠加参考泳道图谱进行曲线比较，查找异常峰的消除或减少来定性分析M蛋白是否存在及类型；对于疑难和特殊图谱，可结合其他实验室检查（如免疫固定电泳或临床其他信息）进行综合判断；判读人员需经专业培训并通过考核，建议实施双人复核及专家仲裁机制（强推荐，高级别证据）。 实验室应全面研读原始图谱数据，定性分析检测样本中是否存在M蛋白及其类型（重链与轻链组合）。图谱分析时，先将目的抗体泳道图谱叠加参考泳道图谱进行曲线比较，查找异常峰的消除或减少（统称为消减）情况。 （六）M蛋白阴性判定标准 在6个泳道中分别加入固定液、抗IgG抗体、抗IgA抗体、抗IgM抗体、抗κ抗体、抗λ抗体（检测后图谱中依次以ELP、IgG、IgA、IgM、κ、λ标注）。加入固定液的泳道的图谱作为对照图谱，加入抗体的泳道图谱作为抗体泳道图谱。抗体泳道图谱与固定液泳道图谱曲线叠加后，未出现特异性峰形缺失或单克隆特征峰消失（以下统称为异常峰），且所有重链泳道消减比例符合正常范围的消减（体内的多克隆免疫球蛋白也会有消减，消减比例符合正常人体内各类免疫球蛋白占比：IgG约80%、IgA约15%、IgM约5%）；轻链消减比例符合κ约2/3、λ约1/3分布。M蛋白阴性的IT图见 图1 。
图1 单克隆免疫球蛋白阴性毛细管电泳免疫分型图（1A为血清蛋白电泳图；1B~1F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，各泳道的消减为成比例消减，未见单克隆免疫球蛋白） （七）M蛋白阳性判定标准 单克隆峰尖锐且界限清晰，单克隆峰在抗重链抗血清（γ、α或μ），抗κ或抗λ轻链的某个或某几个泳道有消减。 图2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 分别为典型的 IgGκ型M蛋白、IgGλ型M蛋白、IgAλ型M蛋白、IgAκ型M蛋白、IgMκ型M蛋白和IgMλ型M蛋白的IT图。还需要特别注意当仅有一个轻链泳道发生消减时，消减可能发生在β区或其他区域，峰形可能为典型的单克隆峰，也可能为非典型的单克隆峰，此时需要考虑轻链的限制型消除，即检测到轻链型M蛋白。轻链κ型IT图见 图8 。轻链的限制性消除还可用于完整的单克隆免疫球蛋白消除的判断的重要依据，轻链限制性表达的Ig Gκ型IT图见 图9 。
图2 IgGκ型单克隆免疫球蛋白毛细管电泳免疫分型图（2A为血清蛋白电泳图；2B~2F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，G泳道及κ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgGκ型的单克隆免疫球蛋白组分）
图3 IgGλ型单克隆免疫球蛋白毛细管电泳免疫分型（3A为血清蛋白电泳图；3B~3F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，G泳道及λ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgGλ的单克隆免疫球蛋白组分）
图4 IgAλ型单克隆免疫球蛋白毛细管电泳免疫分型图（4A为血清蛋白电泳图；4B~4F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，A泳道及λ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgAλ型单克隆免疫球蛋白组分）
图5 IgAκ型单克隆免疫球蛋白毛细管电泳免疫分型图（5A为血清蛋白电泳图；5B~5F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，A泳道及κ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgAκ的单克隆免疫球蛋白组分）
图6 IgMκ型单克隆免疫球蛋白毛细管电泳免疫分型图（6A为血清蛋白电泳图；6B~6F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，M泳道及κ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgMκ型单克隆免疫球蛋白组分）
图7 IgMλ型单克隆免疫球蛋白毛细管电泳免疫分型图（7A为血清蛋白电泳图；7B~7F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，M泳道及λ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgMλ的单克隆免疫球蛋白组分）
图8 游离轻链κ型毛细管电泳免疫分型图（8A为血清蛋白电泳图；8B~8F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，仅κ泳道的单克隆蛋白峰消除，后经免疫固定电泳用游离轻链κ抗血清鉴定为游离轻链κ型单克隆免疫球蛋白组分）
图9 IgGκ型毛细管电泳免疫分型图（9A为血清蛋白电泳图；9B~9F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，轻链限制性表达，则认为存在IgGκ型的单克隆免疫球蛋白组分） （八）异常情况判定 1. 轻链型M蛋白判定标准：当异常峰在重链泳道未发生消减，仅在轻链泳道有消减，怀疑为游离轻链型M蛋白时，需使用琼脂糖凝胶电泳仪上的免疫固定电泳检测程序，用抗kappa游离轻链抗体或抗lambda游离轻链抗体进行确认。当排除游离轻链可能后，需要怀疑为IgD或IgE型M蛋白，此时需使用免疫固定电泳用抗δ链或抗ε链抗血清对重链进行鉴定。疑似IgD或IgE型或游离轻链λ型的IT图见 图10 。
图10 疑似IgD或IgE型或游离轻链λ型的毛细管电泳免疫分型图（10A为血清蛋白电泳图；10B~10F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，仅见λ泳道发生消减，在重链泳道中及κ泳道中没有消减，则认为存在IgD或IgE型或游离轻链λ型的单克隆免疫球蛋白组分） 2. 重链型M蛋白判定标准：异常峰在轻链部分未消减，且与抗重链抗血清有反应，一般可判读为极罕见的重链丙种球蛋白病（γ、α或μ）。γ重链型的IT图见 图11 。
图11 γ（IgG）重链型毛细管电泳免疫分型图［11A为血清蛋白电泳图；11B~11F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，红色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，仅见IgG重链泳道发生消减，在对应的κ和λ泳道没有发生消减，则认为存在γ（IgG）重链型的单克隆Ig组分］ 3. 寡克隆区带的判定标准：在IT检测结果解读时，在抗体泳道出现多个（>2个）微量不连续的异常峰，可判读为寡克隆区带，应在报告中添加备注说明如“可见寡克隆区带”，见 图12 。
图12 寡克隆型毛细管电泳免疫分型图（12A为血清蛋白电泳图；12B~12F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黑色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图。与未加入抗体前的电泳图比较，κ和λ泳道上呈现多个微量单克隆峰的消减，则判读为寡克隆型） 4. 单抗药物干扰：目前临床上单抗治疗药物广泛用于各类肿瘤、自身免疫性疾病的治疗，由于其主要成分为单克隆免疫球蛋白成分，在进入人体血液后，具有一定的半衰期，如果在此期间采集血清，进行免疫固定电泳或IT检测，会出现单克隆的条带或区带，容易对免疫固定电泳和IT的判读造成干扰。单抗药物的类型和迁移位置基本是不变的，如果已知单抗的类型和位置，可以比较容易将内源性的M蛋白和单抗药物条带进行区分，但是当患者的内源性M蛋白与单抗药物条带具有相同的类型和迁移率时，可能产生干扰，此时报告中应添加备注说明如“不排除单抗药物干扰”等。对于此类使用达雷妥尤单抗药物治疗后的样本，建议进行达雷妥尤单抗移除实验，排除药物干扰。单抗药物（达雷妥尤单抗）IT图见 图13 。G泳道及κ泳道的单克隆免疫球蛋白峰消减，则认为存在IgGκ型的单克隆免疫球蛋白组分。达雷妥尤为单克隆IgG κ 型免疫球蛋白。该样本是患者在使用达雷妥尤后采集的样本，因此判断该单克隆为达雷妥尤。
图13 达雷妥尤单抗毛细管电泳免疫分型图（局部放大图，患者在使用达雷妥尤单抗药物治疗后的毛细管电泳免疫分型结果。13A为血清蛋白电泳图；13B~13F分别为血清与 IgG、IgA、IgM 的重链、总轻链κ、总轻链λ抗体结合后的电泳图；黄色曲线为未加入抗体前待检血清的电泳图，蓝色曲线为加入抗体后的电泳图） 综上，对于疑难和特殊图谱，需要结合其他实验室检查或临床信息进行综合判断，并采取以下方式：（1）采用免疫固定电泳方法再次检测分析；（2）调整样本浓缩或稀释比例后使用IT再次检测分析；（3）样本解聚处理后使用IT再次检测；（4）存在单抗药物的干扰，需要建议进行单抗移除实验或结合其他临床信息证实药物干扰。 （九）判读人员要求 判读人员需具备相关专业资质和经验，熟悉IT技术的原理、操作规程及结果解读方法。在上岗前，应接受至少1个月的IT检测原理、判读标准，以及检测图谱判读的系统培训，并对上述培训内容进行考核且成绩合格后，颁发可进行IT检测及报告发放的资质证书。为确保结果的准确性，实验室应建立双人复核制度及报告发布制度；复核的双人需具有初级职称以上的检验师资质，且获得项目授权，发布报告的人员需具有中级职称或以上的检验师资质，且获得项目授权。如存在分歧，应进行再次检测复核或请教同行专家进行仲裁。 有条件的实验室可开发或利用人工智能（artificial intelligence，AI）分析软件对IT图谱进行结果判读。AI输出初步结果后，需由1名中级及以上检验师复核异常结果。IT判读流程图见 图14 。
图14 毛细管电泳免疫分型判读流程图 共识4 当标本呈现多克隆免疫球蛋白升高的高背景时，建议使用IT进行检测，能够更清晰地识别异常峰（强推荐，高级别证据）。 多克隆免疫球蛋白升高常见于多种病理状态，如自身免疫性疾病、慢性感染和某些恶性肿瘤等。这些情况下，患者的血清中会出现大量不同种类的免疫球蛋白，增加了M蛋白检测的难度。多克隆免疫球蛋白升高在电泳时会导至γ区出现宽谱带现象，免疫固定电泳图谱很难从密集浓染的区域中判断是否存在M蛋白，IT法可以清楚看到宽谱带中的异常带，提高了检测的准确性 ［ 7 ］ 。此外，在分析更靠近阴极的M蛋白时，毛细管电泳免疫分型效果优于免疫固定电泳 ［ 5 ， 8 ］ 。 共识5 当血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）提示β区存在M蛋白时，建议使用IT进行M蛋白鉴定，以辅助M蛋白的定量（强推荐，高级别证据）。 M蛋白会存在与β区的多克隆免疫球蛋白或其他蛋白（如转铁蛋白、C反应蛋白等）发生共迁移的情况 ［ 9 , 10 ］ ，而毛细管电泳法采用高电压和液体缓冲系统，分离分辨率显著提高，能够更清晰地分离β区的M蛋白，IT软件可以根据电泳峰消减的高度、面积等参数来进行区分，辅助SPE的定量 ［ 11 , 12 ］ 。 共识6 IT标准的检测报告应以图文形式展现，内容应包括医院名称及患者信息、结果图谱、检测结果等（强推荐，高级别证据）。 检测报告单的格式和内容是确保检测结果准确传达的重要环节。如果检测结果为阳性，应详细说明阳性条带的强度，报告应明确列出完整M蛋白的类型（如IgGκ、IgAλ、IgM λ等）、重链型M蛋白（如IgG重链）及其轻链类型M蛋白（κ或λ）；若为可疑阳性结果，在相应的M蛋白报告项目中报告“阳性”，并建议患者定期复查。建议在报告中描述是否存在免疫抑制现象。免疫抑制主要表现为正常多克隆免疫球蛋白产生受到抑制，但并非所有患者都会出现，由于免疫功能受损，患者更容易发生感染，且感染的严重程度可能更高；其感染程度与MM的疾病分期呈正相关，晚期患者更易出现。免疫抑制的严重程度和持续时间因个体差异而异，需要结合患者的临床表现和实验室检查结果进行综合评估。 此外，报告中还应包含医院要求的相关信息、电泳图谱及其结果注释等内容，标准化的报告格式可以帮助医生更好地解读检测结果，辅助诊断和指导治疗决策。所有报告均应由具有获得项目授权资质的检验人和审核人签字确认后方可发出，报告示例见 图15 。
共识7 IT与IFE在M蛋白检测上一致性较高。IT自动化程度高、耗时短，可成为IFE的有效替代方法。需注意，当IT结果存疑时，可联合IFE等其他实验室检查进一步确认（弱推荐，中级别证据）。 既往研究显示，IT和IFE在M蛋白检测中表现出高度一致性，IT的全自动化流程、多通道批量检测及低人为误差风险，可显著提升检测效率 ［ 5 ， 13 , 14 ］ 。目前，IFE仍为国内外M蛋白相关疾病指南推荐的常规检测项目，但实验室可采取分层检测策略：当SPE检测到窄底尖峰或血清蛋白电泳怀疑含有M蛋白时，可用IT方法进行确认，适用于中大样本量检测；当 IT 结果存疑或轻链型 M 蛋白时，可通过 IFE进行复测。两者结果一致时可增强诊断信心，若出现差异需从样本质量、个体差异和操作规范等维度溯源，结合其他实验室检查综合判断。 二、IT的临床应用 随着IT技术的自动化及人工智能的迅速发展，许多医疗机构已经逐步开始采用IT替代传统的IFE，并成为国内外临床专家的关注点。IT在相关专家共识或指南中，其检测性能和诊断效能得到了肯定和推荐。 2021年美国病理学家学会为M蛋白实验室检测制定的循证指南中明确指出IT具有和IFE同等的检测效力 ［ 15 ］ 。2023年9月28日中国老年保健医学研究会发布的团体标T/CAGR010-2023《多发性骨髓瘤实验室检查指南》中将毛细管电泳分型检测写入，检测意义与血清免疫固定电泳相同。经过专家组充分研讨，最终形成以下5条临床应用共识。 共识8 当患者疑似患有M蛋白相关疾病时，应开展包括IT在内的M蛋白检测项目，进行M蛋白的筛查与鉴定（强推荐，高级别证据）。 当患者出现不明原因的免疫球蛋白水平异常（显著升高或降低）、血液系统异常（贫血、红细胞或血小板异常增高）、肾脏损害（蛋白尿、血尿、肾功能异常）、心脏损害（心肌病、心力衰竭）、神经系统症状（周围神经病症状如手足麻木或疼痛）、反复发作的慢性荨麻疹，以及肝脾肿大等情况时，应考虑M蛋白作为潜在病因，进行M蛋白筛查 ［ 16 ］ 。对于不明原因的相关症状，早期筛查M蛋白有助于明确诊断并制定针对性治疗。多种检测手段的联合使用，可提高早期诊断率并减少漏诊风险。鉴于IT与IFE检测性能等价 ［ 5 ， 14 ］ ，联合SPE、IFE或IT与血清游离轻链（serum free light chain，sFLC）的检测组合可覆盖绝大多数M蛋白相关疾病 ［ 15 ］ ，提高 M蛋白的检出率。 共识9 在SPE出现M蛋白尖峰时，应考虑M蛋白的存在，建议使用IFE或IT进一步分析，以明确M蛋白的类型（强推荐，高级别证据）。 M蛋白是MM及其他浆细胞疾病的特征性标志，分型对于精准诊断至关重要。IFE作为标准检测手段，具有较高的敏感度和特异度，能够通过重链和轻链的特异性抗体检测M蛋白的类型 ［ 5 ］ 。美国CAP2021指南推荐当SPE结果异常时，应开展IFE或具有相似灵敏度的可替代方法进行M蛋白的确认 ［ 17 ］ 。考虑到IT与IFE在M蛋白检测上具有中等及以上的一致性 ［ 13 ， 18 ］ ，在某些特殊案例中表现更佳的检测能力 ［ 19 ］ ，本共识推荐当SPE检测到M蛋白峰时，可使用IT进一步确认M蛋白的类型，以辅助早期诊断M蛋白相关疾病。 共识10 对IFE检测结果呈阴性或存疑的病例（如怀疑为寡分泌型多发性骨髓瘤、系统性轻链型淀粉样变性等），建议使用IT联合其他项目如sFLC等进行检测，以提高低水平的M蛋白相关疾病的诊断（专家推荐，低级别证据）。 当IFE对低浓度的M蛋白或轻链的检测存在漏检的情况时，结合sFLC检测，可以提高疑似M蛋白相关疾病的诊断率 ［ 15 ］ 。研究表明，结合sFLC检测，IT在系统性轻链型淀粉样变患者中的检测表现与传统IFE相当，此类疾病的检测阳性率显著提高 ［ 17 ， 19 ］ 。IT或IFE联合sFLC检测显著提升诊断敏感性，尤其对低浓度的单克隆蛋白。因此，对IFE检测结果呈阴性或存疑的病例，建议使用IT检测同时联合其他检测项目或方法，如sFLC检测和质谱检测 ［ 20 , 21 ］ ，以提高对低水平M蛋白相关疾病的诊断。 共识11 对于一些患者，特别是IgA型骨髓瘤，若SPE显示存在β区共迁移的情况，可使用基于IT图谱的工具进行M蛋白定量，便于疗效评估及随访（专家推荐，低级别证据）。 IgA型骨髓瘤的M蛋白常与β区球蛋白重叠，易被传统的以凝胶为基质的SPE方法误判或漏诊 ［ 22 , 23 ］ ，国际骨髓瘤工作组推荐IgA型MM患者需进行IgA定量检测评估疾病 ［ 24 ］ 。IT在β2峰或 β1-β2 区间的低丰度单克隆成分检测中分辨率更高 ［ 13 ， 22 ］ ，能更清晰识别峰型变化，因此，对于IgA型MM患者，建议使用基于IT图谱的工具实现进行M蛋白定量，进行疗效评估 ［ 25 , 26 ］ 。 共识12 推荐使用IT结合血/尿蛋白电泳，参考多发性骨髓瘤、系统性轻链型淀粉样变性等疾病的血液学疗效评估标准，对患者进行疗效监测和定期随访（弱推荐，中级别证据）。 M蛋白水平的动态监测是评估治疗反应和判断预后的重要指标。国内外指南推荐在治疗及随访过程中应定期监测M蛋白水平，以评估治疗疗效和判断疾病缓解状态 ［ 24 ， 27 , 28 ］ 。在评估患者是否达到完全缓解时，需满足IFE结果阴性。而IT作为IFE等价的检测手段，亦可作为疗效评估的方法之一。毛细管电泳免疫分型临床决策流程见 图16 。
三、展望 IT作为一种新兴的实验室检测技术，在临床诊断和治疗监测中的应用前景广阔。未来，随着技术的不断发展和优化，IT将为临床提供更精准的检测，更好地服务临床，造福患者。 执笔人： 陈瑜［浙江大学医学院附属第一医院血液科浙江省血液肿瘤（诊治）重点实验室］，杨敏（浙江大学医学院附属第一医院血液科），杜华平（浙江大学医学院附属邵逸夫医院血液科），马秋玲［河南省中医院（河南中医药大学第二附属医院）血液科］ 共识核心专家（按姓氏笔画排序）： 王昌敏（新疆维吾尔自治区人民医院检验科），王长印（山东第一医科大学附属省立医院检验科），尤良顺（浙江大学医学院附属第一医院血液科），叶宝东（浙江省中医院血液科），付璐（哈尔滨医科大学附属第一医院检验科），吕礼应（安徽医科大学第一附属医院检验科），朱宏丽（解放军总医院第二医学中心血液科），朱尊民（河南省人民医院血液科），刘竞（中南大学湘雅三医院血液科），刘家云［空军军医大学第一附属医院（西京医院）检验科］，刘耀（重庆大学附属肿瘤医院血液科），江松福（温州医科大学附属第一医院血液科），纪玲（北京大学深圳医院检验科），侯健（上海交通大学医学院附属仁济医院血液科），佟红艳（浙江大学医学院附属第一医院血液科），杨婷（福建医科大学附属协和医院血液科），**花（山西医科大学第二医院血液科），何爱丽（西安交通大学第二附属医院血液科），何谦（西安交通大学第二附属医院检验科），吴胜军（浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科），汪萍（上海交通大学医学院附属新华医院检验科），沈建平（浙江省中医院血液科），张义（山东大学齐鲁医院检验科），陈苏宁（苏州大学附属第一医院血液科），孟海涛（浙江大学医学院附属第一医院血液科），胡炎伟（首都医科大学附属北京朝阳医院检验科），夏永明［宁波大学附属阳明医院（余姚市人民医院）血液科］，娄加陶（上海市第一人民医院检验科），徐银海（徐州医科大学附属医院检验科），崔丽艳（北京大学第三医院检验科），韩建华（北京协和医院检验科），童向民（西湖大学医学院附属杭州市第一人民医院血液科） 共识讨论专家（按姓氏笔画排序）： 于爱清（湖南省人民医院检验科），王凤清（福建医科大学附属第一医院检验科），王世兵（西湖大学医学院附属杭州市第一人民医院检验科），王金行（中国医科大学附属第一医院检验科），王美英（内蒙古医科大学附属医院检验科），王琳（上海市第一人民医院检验科），王森（南京鼓楼医院检验科），王晶莹（吉林大学中日联谊医院检验科），方宏罡（大庆油田总医院检验科），邓中华（湖南省人民医院检验科），甘文佳（中山大学附属第一医院检验科），艾清（吉林大学附属第一医院乐群院区检验科），左江华（邢台市人民医院检验科），付书南（遵义医科大学附属医院检验科），白顺杰（重庆医科大学附属第一医院检验科），冉连会（贵州医科大学附属第一医院检验科），冯品宁（中山大学附属第一医院检验科），宁乐平（广西壮族自治区人民医院检验科），伍柏青（江西省人民医院检验科），成士清（山东第一医科大学附属省立医院检验科），朱国庆（中国医学科学院血液病医院临床检测中心），刘利东（广州医科大学附属第一医院检验科），刘佳丽（西安交通大学第二附属医院检验科），刘敏（徐州医科大学附属医院检验科），邢宏运（西南医科大学附属医院血液科），沈佳坤（江西省上饶市人民医院血液科），孙一奎（宁波大学附属第一医院检验科），严琳（四川大学华西医院检验科），李士军（大连医科大学附属第一医院检验科），李云慧（北部战区总医院检验科），李甲勇（上海市第一人民医院检验科），李若煦（陆军特色医学中心检验科），李昆（锦州医科大学附属第一医院检验科），李秋晨（上海市第一人民医院检验科），李振国（大连医科大学附属第二医院检验科），李毅［陆军军医大学第二附属医院（新桥医院）检验科］，李燕（新疆生产建设兵团第四师医院检验科），牧启田（宁波大学附属第一医院干细胞移植实验室），杨伟（云南省肿瘤医院检验科），杨建荣（温州医科大学附属第一医院检验科），吴伟华（沧州市中心医院检验科），吴超（中山大学附属第八医院检验科），何春玲（陕西中医药大学第二附属医院血液科），冶薇（新疆医科大学附属肿瘤医院检验科），宋卫青（青岛市市立医院检验科），宋鉴清（中国医科大学附属第一医院检验科），张兴旺（甘肃省人民医院检验科），张丽翠（石河子大学第一附属医院检验科），张建（山东大学齐鲁医院检验科），张莹［空军军医大学第一附属医院（西京医院）检验科］，张鹏（南方医科大学南方医院检验科），陈鸣［陆军军医大学第一附属医院（西南医院）检验科］，陈程（新疆维吾尔自治区人民医院检验科），陈慧丹（福州大学附属省立医院检验科），林炜炜（上海交通大学医学院附属仁济医院东院检验科），罗丹（长沙市中心医院检验科），金敏雅（浙江省台州医院检验科），居来提·阿扎提（新疆医科大学第二附属医院检验科），赵伊婷（新疆医科大学第六附属医院检验科），赵冠飞（首都医科大学附属北京朝阳医院检验科），胡波（中山大学附属第三医院检验科），郝世瑞（邢台市人民医院检验科），姚立琼（兰州大学第一医院检验科），姚瀚鑫（吉林大学附属第一医院检验科），耿聪（大连医科大学附属第二医院检验科），贾成瑶（四川大学华西医院检验科），贾雄飞（解放军联勤保障部队第九二○医院检验科），夏骏（浙江省人民医院检验中心），徐双（北京大学人民医院检验科），徐安平（北京大学深圳医院检验科），徐含青［陆军军医大学第一附属医院（西南医院）检验科］，徐志晔（南京鼓楼医院检验科），徐雪松（吉林大学中日联谊医院检验科），高玉洁（南昌大学第一附属医院检验科），高春海（临沂市人民医院检验科），桑国耀（新疆医科大学第一附属医院检验科），黄庆（陆军特色医学中心检验科），黄芳（桂林市人民医院检验科），黄惠芳（苏州大学附属第一医院临床检测中心），曹芸（上海交通大学医学院附属仁济医院西院检验科），曹炬（重庆医科大学附属第一医院检验科），曹鹏龙（大连医科大学附属第一医院检验科），梁珊珊（四川大学华西医院检验科），彭玲（中南大学湘雅医院检验科），葛晓军（遵义医科大学附属第二医院检验科），董作亮（天津医科大学总医院检验科），董海新（济宁医学院附属医院检验科），董慧敏（中山大学附属第三医院检验科），曾飞（遵义医科大学附属第二医院检验科），禄婷婷（贵州医科大学附属医院检验科），雷秋香（邢台市人民医院检验科），蔡蓓（四川大学华西医院检验科），潘华政（青岛大学附属医院检验科），潘建华（长沙市中心医院检验科），穆润清（中国医科大学附属第一医院检验科），魏莲花（甘肃省人民医院检验科） 参考文献（略） |
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