关于Xpert MTB/RIF的一点小知识

Xpert MTB/RIF中文全名是结核分枝杆菌及利福平耐药基因检测，是一种检测结核分枝杆菌复合体DNA的自动诊断测试方法。

它的检测位点是结核分枝杆菌rpoB基因，并进行耐药相关突变的检测，rpoB基因是95%结核分枝杆菌发生利福平耐药的基因位点，该基因突变会导至RNA聚合酶β亚基构象变化，降低利福平与靶点的结合亲和力。

该技术在2014年被WHO认可，被用于结核菌涂片与培养的替代检查。

该检查方法操作流程主要包括2部分：

1. 样本处理：痰液、脑脊液等样本与裂解液混合后，完成裂解和DNA提取。

2. 扩增与检测：试剂盒内置冻干试剂，系统自动完成半巢式PCR扩增和荧光信号分析，无需人工干预。

该技术具有5个显著的优势：

1.检测结果快：只需要2个小时。

2.检测结果灵敏度高：最低检测限为5个MTB基因组拷贝或131 CFU/mL痰液，显著高于涂片镜检（10,000 CFU/mL）。

3.检测方便：只需要较少的动手技术时间，该技术只需要将样本加入到GeneXpert试剂盒后，便可以等待结果。

4.结果一致性高：样本的处理和PCR扩增及检测全在一个自封闭的检测单元中进行，人为技术影响小。

5.生物安全性高：处理样本的试剂具有强大的杀菌能力。

Xpert这项技术分为G1,G2,G3,G4和Ultra，5个世代，目前主要为G4版本，Ultra技术是最新的检查方法，相较于之前方法灵敏度更高，但特异度相对减低。

注：

1. 由于没有氢氧化钠处理胃酸，目前胃液检测暂时无法进行，其他检测标本均可以进行。

2. 血液样本不能进行Xpert检查。

总体而言：

1. Xpert特异度很高，一旦出现阳性要高度考虑结核感染。

2. Xpert灵敏度在能找到细菌的儿童肺结核中较高，普遍在60-70%的水平，但是由于儿童肺结核含菌量小，如果以临床诊断作为金标准，其灵敏度只有20-30%左右。

3. Xpert在肺外结核中灵敏度显著高于肺结核。

4. 以个人浅显的临床经验和阅读文献思考来说，组织Xpert的灵敏度应该远高于液体的灵敏度，这与这篇综述不相同，比如结核性胸膜炎活检组织的灵敏度可达到90-100%³。

参考文献来源：

1.Kay AW, Ness T, Verkuijl SE, Viney K, Brands A, Masini T, González Fernández L, Eisenhut M, Detjen AK, Mandalakas AM, Steingart KR, Takwoingi Y. Xpert MTB/RIF Ultra assay for tuberculosis disease and rifampicin resistance in children. Cochrane Database Syst Rev. 2022 Sep 6;9(9):CD013359. doi: 10.1002/14651858.

2.Kohli M, Schiller I, Dendukuri N, Dheda K, Denkinger CM, Schumacher SG, Steingart KR. Xpert® MTB/RIF assay for extrapulmonary tuberculosis and rifampicin resistance. Cochrane Database Syst Rev. 2018 Aug 27;8(8):CD012768. doi: 10.1002/14651858.

3.ShawJA, Diacon AH, Koegelenberg CFN. Tuberculous pleural effusion. Respirology. 2019Oct;24(10):962-971. doi:10.1111/resp.13673.