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[分享] 【独家】Diana:从试验员到项目经理:(41)我的研发实验记录(续1)

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发表于 2018-4-25 10:07 | 显示全部楼层 |阅读模式

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我们在上周说了研发实验记录的重要性的问题。既然实验记录有着这么大的作用,那么要如何做实验记录呢?我个人认为实验记录应该有如下的基本内容:实验目的、实验设计、实验材料、过程和步骤、数据、结果及分析。这些都是非常重要的内容,对于一个完整的实验来说缺一不可。

1、实验目的
实验目的的表述是为了区分每个实验,每个阶段的实验所要完成的目标,所以要合理的设定实验目的,且不可过大过泛。
另外,实验目的在实验记录通篇的首项,可以起到实验提示的效果,间接而直接的实验目的表述可以为今后实验记录的查询提供非常便利的条件。
例如,在PCR实验中引物的设计筛选是非常关键的研发过程。
如果在实验记录中将这部分的实验目的全部记录为:引物设计筛选则没有任何的区分度。
而相对来说,如多重PCR记录为:
实验目的:XXX引物的设计筛选第1次
实验目的:XXXX引物的设计筛选第5次。。。。。。

这样的实验目的更加直观明了,也便于今后对数据的汇总总结。


2、实验设计
实验设计不同于实验步骤,实验设计应该是依据实验目的且为了完成这个目标而需要开展的工作。这个工作不应该包括具体的步骤,但应该包括这些工作的基本方向和过程。
例如,我们前面说道的那个最低检出限实验,其实验设计如下:
实验设计:通过倍比稀释已知浓度的高浓度样品,制成梯度考察样品后进行PCR实验过程,同时还应该考虑带入阴性样品、纯化水样品一并进行PCR实验。实验过程中每份样品应双孔扩增。

通过以上的实验设计,我们可以非常清楚的知道在接下来的实验过程中需要完成的重点工作:
(1) 高浓度样品的稀释必须是倍比稀释
(2) PCR试验时应带入倍比稀释后的系列样品,而不是仅仅检测目标样品(这点在前期研发中特别重要);
(3) PCR试验过程还应同时带入阴性样品和纯化水样品,注意,我在这里区分了阴性样品和纯化水样品,这两个是不一样的哦。
(4) PCR试验时应双孔上样。


我想有人看到这里肯定会问这样做实验设计的目的是什么呢?让我来逐一分析:
(1) 高浓度样品做倍比稀释的目的,我想大家都很清楚了,这里应该不需要说了。
(2) 稀释后的系列样品在实验过程中应尽可能的全数带入,是因为此时我们还不知道我们的试验系统真正可以检查出来的目标结果是多少,虽然,我们在实验之初希望该系统可以达到最低检出限的目标,但是不是真的如我们所愿是需要实验数据说话的,所以在这里应该尽可能的全数带入稀释系列样品。这点在前期研发中其实尤为重要。
但在试验系统进行了调整、主要原辅料更换供应商甚至是生产工艺进行调整时,都是非常关键的部分。
(3) PCR试验过程中带入阴性样品和纯化水。
我们都知道在正常的PCR实验中阴性样本和纯化水应该得到相同的结果,但实际上是如此吗?没有数据怎么能够说明问题。
另外,阴性样品和纯化水实际上在PCR实验中扮演着不同类型的“角色”,所以,不应该将阴性样品和纯化水划等号,虽然两者在最终的试验结果的表现上一致。
阴性样品提示的不含目标待测物的样品经过样品处理过程和PCR试验后的应该呈阴性结果。
纯化水提示了试验过程和PCR试验环境有无污染。
所以两者的目的和作用是不同的。
(4) PCR试验时双孔上样的目的是为了避免出现未扩增的结果。
我们都知道PCR试验是非常敏感的,但也会在试验过程中出现偶然的情况,这些偶然情况并没有规律可循也无法重复。所以,在试验过程中为了避免这些偶然因素可能发生的影响,采用双孔复试的方式是比较稳妥的。

本系列文章为小桔灯网专栏作者Diana_zhang原创文章,供小桔灯网独家发表。
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发表于 2020-8-1 09:14 | 显示全部楼层
学习了,作为一名质量技术人员,要知道试验如何做,如何才能 达到要求
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