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[分享] 医学干货︱T-SPOT:想说爱你并不是很容易的事!

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发表于 2017-11-2 17:42 | 显示全部楼层 |阅读模式

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医学没有100%!对于这句话,很多人并不以为然。认为这种理念是一种领人不齿的折中主义。可是,我想表明的态度是:医学永远是不断接近真理的一门科学。所以,作为医学重要的组成部分、所有检测手段或许也是存在缺憾的,比如T-SPOT就是一种想爱却又不容易的检验方式。
“T-SPOT”实际上是检测试剂盒“T-SPOT.TB®”的简称。T-SPOT.TB是γ干扰素释放试验(interferon gamma release assay,IGRA)的一种,具体采用的检测方法是一种简化的酶联免疫斑点(enzyme-linked immunospot ,ELISPOT),用于体外检测外周血中经过结核分支杆菌特异性抗原激活的效应T细胞。
T代表效应T细胞,SPOT即斑点,TB代表结核。
T-SPOT.TB®由英国 Oxford Immunotec 公司生产
一、T-SPOT检测的机理是什么?
人体对结核分枝杆菌的免疫反应主要通过T细胞活化介导。对结核分枝杆菌致敏的T细胞,再次接受结核相关抗原刺激后,活化的效应T细胞(包括 CD4+和 CD8+T 细胞)能够产生γ干扰素,通过ELISPOT 技术可以检测产生γ干扰素的单个T细胞。ELISPOT检测是高灵敏度的,在细胞分泌的细胞因子扩散稀释前,其能够立即捕获细胞周围所分泌的细胞因子,灵敏度超过传统的酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。
T-SPOT检测用来刺激T细胞的是结核分枝杆菌特异性抗原→ESAT-6和CFP10抗原,这两个抗原在BCG菌株和绝大部分非结核分枝杆菌(除外堪萨斯分枝杆菌、苏氏分枝杆菌、海分枝杆菌)中都不存在,因此有较高的特异性,跟卡介苗和绝大部分的肺结核分支杆菌无交叉反应。
所以,T-SPOT检测通过ELISPOT技术和特异性抗原,从原理上保证了其一定的敏感性及特异性。
二、为什么说T-SPOT检测既完美又不完美?
然而,T-SPOT检测结果却不能作为单独或是决定性的诊断活动性结核病的依据。
T-SPOT阳性结果仅仅提示患者体内存在结核杆菌特异的效应T细胞:即患者存在结核感染或者有可能是堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌等少数几种非结核分枝杆菌感染引起的。但是否为活动性结核病,需结合临床症状及其它检测指标综合判断。
结核感染通常表现为显性感染和潜伏性感染。显性感染即活动性肺结核,在大多数传染病中,显性感染只占全部受感染者的一小部分。潜伏性感染又称潜在性感染,病原体感染人体后,寄生于某些部位,由于机体免疫功能足以将病原体局限化而不引起显性感染,但又不足以将病原体清除时,病原体便可长期潜伏起来,待机体免疫功能下降时,则可引起显性感染,潜伏感染期间,病原体一般不排除体外。
结核潜伏性感染(Latent Tuberculosis Infection, LTBI)具有发展为活动性结核病的风险。活动性结核与LTBI是结核分枝杆菌感染的不同阶段,IGRA检测的结核分枝杆菌特异性效应T细胞经特异性抗原刺激后释放的γ干扰素,在活动性结核与潜伏结核感染(LTBI)中均有释放。多项研究结果显示IGRA都只能判断是否感染结核,但无法鉴别活动性结核与LTBI。
因此,IGRA对活动性结核病的诊断价值有限。
另一方面,T-SPOT阴性结果提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。但是如出现以下情况 ,阴性结果却不能排除结核杆菌感染的可能:
1、因感染阶段不同(如标本是在细胞免疫发生前获取的)引起的假阴性结果;
2、少数免疫系统功能不全的情况,如HIV感染者、肿瘤患者、儿童等;
3、以及其它免疫学、实验非正常操作的差异。
综上所述,我们不能过分依赖TSPOT检测,其结果只能作为诊断参考依据,一句话:T-SPOT,想说爱你并不是很容易的事!
文章来自:孙峰医生

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