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[分享] 病理科开展荧光原位杂交(FISH)检测新技术

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发表于 2014-9-18 01:27 | 显示全部楼层 |阅读模式

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                    病理科开展荧光原位杂交(FISH)检测新技术
        FISH技术系用荧光基团标记特异性探针,再将标记了荧光信号的探针与待测样本进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数。最终通过荧光信号的颜色和数目的异常与否,达到对染色体疾病诊断、恶性肿瘤预测及预后判断的目的。
       2008年病理科参与并顺利完成了国家卫生部“荧光原位杂交技术检测子宫颈上皮细胞hTERC基因扩增的临床应用研究”子课题任务,获得了全套FISH相关设备。初步结果显示,hTERC基因在CIN2,CIN3及原位癌中有较高的表达率,并呈依次增高改变,这为临床干预判断提供了一定方向。与此同时,病理科还对FISH在其他肿瘤或疾病诊断方面的应用进行了摸索,除了宫颈上皮细胞hTERC基因扩增外,现可开展的项目还包括石蜡组织乳腺癌Her-2基因检测、非小细胞性肺癌EGFR基因扩增检测,尿液膀胱癌相关基因异常的检测等。除帮助诊断外,上述基因改变的检测也为临床靶向药物治疗提供了重要依据。
为帮助相关科室了解FISH技术的意义,以下针对部分检测项目作进一步说明。
1.乳腺癌HER-2基因扩增检测
【检测意义】
    大约25%-30%的乳腺癌有HER-2/neu基因扩增。有HER-2基因扩增的患者预后更差,淋巴结转移几率高,复发风险高。HER-2基因扩增检测有助
(1)指导内分泌治疗:HER-2基因扩增患者对内分泌治疗药物易产生耐药。(2)合理选择辅助化疗药物:HER-2基因扩增患者对CMF化疗方案的反应性降低。
(3)HER-2基因扩增患者宜采用紫杉醇化疗和高强度的蒽环类药物。
(4)筛选分子靶向药物的适用者:HER-2基因扩增患者适合使用靶向药物赫赛汀(herceptin)治疗。
2.子宫颈癌筛查检测(子宫颈细胞TERC基因位点扩增检测)
【检测意义】
    宫颈活检的患者一般都是细胞学检查出现ASC-US以上级别的,根据TERC基因与宫颈病变病理分级的相关性,子宫颈细胞TERC基因位点扩增检测能将ASC-US/CIN Ⅰ(低度癌前病变)和CIN Ⅱ/CIN Ⅲ(高度癌前病变)进行区分。TERC基因扩增表明从CIN Ⅰ/CIN Ⅱ发展到CIN Ⅲ的风险在52%-96%之间,其灵敏度为100%,特异性为70%。
    该检测可以为后续诊治提供重要依据。
3.膀胱癌细胞染色体及基因异常检测
【检测意义】
    该项目对CSP 3/CSP 7,GLP P16/CSP 17基因进行检测。适用于:
(1)血尿患者
       在常规B超检查或腹部平片排除结石之后即可应用,目地是确认是否恶性血尿,提供进一步CT或膀胱镜定位及确诊。
(2)泌尿系统移行上皮癌的早期诊断
    排除恶性血尿,其特异性为96%-98%,敏感性大于80%。
(3)膀胱癌术后复发监测
    通过尿液即可检测的非创伤性诊断方法,且不受膀胱灌注治疗影响,可早于形态学3-6个月发现异常。
4.肺癌EGFR基因检测   
【检测意义】
       大多数非小细胞肺癌的发生发展依赖于活化的EGFR基因,针对EGFR基因扩增和基因突变的检测能够明确酪氨酸激酶抑制剂类药物的使用方案。
       EGFR的改变有两种形式,一种是基因扩增,一种是基因突变,因个体差异,两种情况不一定同时存在,意味着只有2项都查才能最为准确的判断是否适合使用靶向药物。对于两种异常同时存在的患者使用易瑞沙疗效显著。30%-40%非小细胞肺癌患者存在EGFR基因扩增,EGFR基因扩增的患者,应用靶向药物的有效率为35 % , 疾病控制率高达70 %。
       无EGFR基因扩增的患者应用靶向药物的有效率仅为9.8%。
       FISH法可用于查基因扩增,而查基因突变需采用荧光定量PCR法。外显子19/外显子21点突变,占中国人群非小细胞肺癌患者体细胞突变的82.8%,突变型非小细胞肺癌用Iressa/Tarceva有效率>80%,无突变病人用Iressa/Tarceva有效率仅为10%。
5.TOP2A基因异常检测
        在乳腺即及其他各种癌的治疗过程中,应用较为广泛的化疗药物是蒽环类药物。
        TOP2A基因异常有两种情况: TOP2基因扩增和TOP2A基因缺失; FISH可对于这两种情况作出明确判断。
       TOP2A 基因异常患者对于含蒽环类药物的治疗方案更敏感:相对于使用CMF方案来说,TOP2A 基因异常的患者使用CEF方案进行治疗可以降低61%的复发风险和51%的死亡风险,而没有TOP2A基因异常的患者使用CEF方案只能降低6%的复发风险和10%的死亡风险。使用CEF
方案的患者,无复发生存期和总生存期更长。


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